凯氏定氮法测定奶粉中蛋白质.pptVIP

凯氏定氮法测定奶粉中蛋白质 南华大学预防医学与放射卫生实验教学中心 一、目的意义 食物中蛋白质含量是求人体蛋白质摄入量的基础资料。 通过本方法的学习以期： 掌握方法的原理、测定步骤； 了解蛋白质系数在蛋白质含量计算中的应用。 二、原理 三、操作步骤 四、计算 五、说明 六、思考题 * * * 蛋白质是含氮的有机化合物，在强热和浓硫酸的作用下，可被消化(分解)生成(NH4)2S04。 在凯氏蒸馏器中，(NH4)2S04与碱作用，通过蒸馏将氨放出，收集于硼酸溶液中，用已知浓度的HCl溶液滴定。 根据HCI消耗量计算出氨的含量，再乘上蛋白质系数即可得蛋白质含量。 样品称重 视样品含氮量称取均匀样品1g左右，放于凯氏烧瓶内； 消化 在凯氏烧瓶内加入： 小玻璃珠二粒 硫酸钾2g， 10％硫酸铜2ml 浓硫酸20ml 瓶口加一小漏斗，在煤气灯上隔石棉网直接加热，时时转动凯氏烧瓶，防止溶液起泡外溅。待样品中泡沫消失后可加大火力，烧至溶液蓝色透明，待冷却后取下； 稀释 加少量蒸馏水把样品反复数次洗涤移人250ml容量瓶中，以蒸馏水稀释至刻度。 蒸馏 蒸馏器示意图见图1。 食品中的蛋白质(％) 蛋白质系数×14×mol／L ×（V2-V1）×稀释倍数 V3×10