医学论文：浅谈胆固醇结石与载脂蛋白b基因多态性的关系.docVIP

浅谈　　【摘要】　目的　探讨胆固醇结石病与载脂蛋白(apo)b基因多态性的关系。方法　选择载脂蛋白b基因多态位点xba?、ecor?应用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性(pcr-rflp)技术对101例胆固醇结石病人和50例对照者进行研究。结果　胆固醇结石组x+等位基因频率显著高于对照组(p＜0.05)，具有x+等位基因者其血脂总胆固醇(tc)、低密度脂蛋白胆固醇(ldl-c)及apob水平显著高于非x+者(p＜0.01)；胆固醇结石组和对照组在ecor?等位基因频率和血脂水平方面差异均无显著性(p＞0.05)。结论　x+等位基因可能是胆固醇结石的易感基因。 　　relationship between polymorphisms of the apolipoprotein b gene and cholesterol gallstone disease ? 　　【abstract】 objectiveto investigate the relationship between the apolipoprotein (apo)b gene polymorphic sites xbal, ecori and cholesterol gallstone disease.methods　two polymorphic sites xbal, ecori of apob gene were selected. using polymerase chain reaction and restriction fragment length polymorphism technique 101 patients with cholesterol gallstone and 50 controls were investigated.results　the frequency of rare allele x+ was significantly higher in the patients with cholesterol gallstone than in the controls. patients with x+ allele had higher tc, ldl-c and apob levels, significantly different from those without x+ allele. there were no difference between the patient group and the control one in ecori allele.conclusion　x+ allele mightnbs p;be the susceptible gene for cholesterol gallstone disease. 　　【key words】　apolipoprotein b；　gene；　cholelithiasis；　polymorphism 　　我们选取载脂蛋白(apo)b基因xba?、ecor?多态位点应用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性(pcr-rflp)技术研究其等位基因频率在正常人和胆固醇结石病人中的差异及其对血脂代谢的影响，从基因水平探讨胆固醇结石病的发病原因，现将结果报道如下。 　　材料和方法 　　1.对象：本院外科1996年4～8月行选择性胆囊切除术的胆囊结石患者110例。酶法测定结石胆固醇含量，胆固醇含量≥50%的101例为胆固醇结石病例组，其中男42例，女59例，平均(51.3±1.4)岁；以同期非胆石病住院的50例(b超证实无胆结石)为对照组，其中男21例，女29例，平均(49.2±2.9)岁。研究对象均无肝肾疾病、糖尿病和冠心病。 　　2.方法：(1)基因组dna抽提：抽取10 ml空腹静脉血，用酚-氯仿法抽提dna。采用美国gibco-brl公司基因组dna抽提试剂盒提供的方法进行操作。(2)基因多态性分析：按boerwinnkle的报道合成引物［1］：xba?-5′=ggagactattcagaa 　　gctaa；xba?-3′=gaagagcctgaagactgac 　　t；ecor i-5′=ctgagagaagtgtcttcgaag；ecor i-3′=ctcgaaaggaagtgtaatcac。pcr扩增反应：反应管中依次加入10×pcr缓冲液5μl，25 mmol/l mgcl2 5 μl，2 mmol/l dntp 5 μl，20 pmol/l引物各1μl，模板dna 0.4 μg，taq聚合酶2 u，加灭菌去离子水至总反应体积50μl。反应条件：95 预变性5 min。继之95 变性1 min，58 退火1 min，72 延伸