医学论文：高效液相色谱-蒸发光散射法测定补肾斑龙片中黄芪甲苷的含量.docVIP

????????????????????? 作者：王建明,刘相辉,王和平【摘要】? 目的 建立补肾斑龙片质量控制方法。方法 采用高效液相色谱-蒸发光散射法测定黄芪甲苷的含量。结果 线性范围1.44～4.32 μg(r=0.999 9),平均加样回收率为99.69%,rsd=1.16%。结论 本方法简便快速,灵敏度高,为补肾斑龙片的质量控制提供了有效方法。 【关键词】? 补肾斑龙片；高效液相色谱-蒸发光散射法；黄芪甲苷 ??? abstract：objective to establish the quality control method for bushenbanlong tablet. methods the content of astragaloside was determined by hplc-elsd. results the linearity range was 1.44～4.32 μg with a correlation coefficient r=0.999 9, and the average recovery was 99.69% with rsd=1.16%. conclusion the method was simple, convient, quick and sensitive. it provide an effective method for quality control of bushenbanlong tablet.??? 　　key words：bushenbanlong tablet；hplc-elsd；astragaloside???? 补肾斑龙片系由黄芪、鹿茸、肉苁蓉、淫羊藿等13味中药制成的片剂,具有补肾壮阳、填精益髓的功效,用于肾虚、阳痿、早泄、遗精、性欲减退等症。为了控制药品的内在质量,确保药品的疗效,我们对该制剂中黄芪的主要成分黄芪甲苷的含量测定方法进行了研究,确定采用高效液相色谱-蒸发光散射法。此方法简便快速、灵敏度高、重现性好,结果准确可靠,为补肾斑龙片的质量标准制定提供了依据。　　1? 仪器与试药 ??? waters 600e高效液相色谱仪；millennium32色谱工作站数据处理系统；alltech-2000蒸发光散射检测器。 ??? 补肾斑龙片(黑龙江中医药大学中医药研究院制)；黄芪甲苷对照品(中国药品生物制品检定所提供,批号0781- 200109)。其他试剂均为分析纯。　　2? 方法与结果　　2.1? 色谱条件1 ??? 色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱(kromasil c18,4.6 mm×200 mm,5 μm)；流动相：乙腈-水(3268)；柱温30 ；流速1.0 ml/min。蒸发光散射检测器：高纯氮气流速2.5 l/min；漂移管温度105 。理论板数按黄芪甲苷峰面积计算不低于2 000。　　2.2? 对照品溶液的制备 ??? 取黄芪甲苷对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1 ml含黄芪甲苷0.36 mg的对照品溶液。　　2.3? 供试品溶液及阴性样品溶液的制备1 ??? 取本品30片,剥去薄膜衣,研成细粉,取粉末约6 g,精密称定为5.871 6 g,置索氏提取器中,加甲醇40 ml,冷浸过夜,再加甲醇适量,加热回流提取6 h。提取液浓缩蒸干,残渣加水20 ml,微热使溶解,用水饱和的正丁醇振摇提取5次(40、30、30、20、20 ml),合并正丁醇液,用氨试液充分洗涤2次,每次40 ml,弃去氨液,正丁醇液用20 ml水洗涤1次,弃去水洗液,正丁醇液蒸干,残渣用甲醇溶解,并定容于5 ml容量瓶中,作为供试品溶液。去除黄芪的阴性样品溶液的制备同法制得。　　2.4? 空白试验 ??? 取去除黄芪的阴性样品溶液,吸取20 μl,注入液相色谱仪,依上述色谱条件测定,结果在对照品黄芪甲苷出峰的位置无其他干扰峰出现,证明其他药材对黄芪甲苷峰无干扰。对照品、样品及阴性样品色谱图见图1。　　2.5? 线性关系的考察 ??? 精密吸取对照品溶液4、6、8、10、12 μl,分别注入液相色谱仪,依上述色谱条件测得黄芪甲苷峰面积。以峰面积的自然对数为纵坐标,黄芪甲苷量的自然对数为横坐标,绘制标准曲线,得回归方程：y=11.253 4＋1.501 6x,r=0.999 9。表明黄芪甲苷在1.44～4.32 μg范围内线性关系良好。　　2.6? 精密度试验 ??? 精密吸取对照品溶液8 μl,进样,按上述色谱条件测定,连续进样5次,峰面积积分值rsd=0.7%。说明精密度较高。　　2.7? 稳定性试验 ??? 取供试品溶液,于0、2、4、6、8、10 h测定,每次进样20 μl,结果在10 h内峰面积积分值rsd=1.30%。说明供试品溶液在1