放射免疫学作业指导书.docVIP

[仪器] 放射免疫γ计数器 [方法] 放射免疫分析法 [原理] 将甲状腺制成衍生物(T3X)后,与血清蛋白的结合能力失去或大大减弱,但仍完全保持原有的与相应抗体的结合能力.在反应体系中,当血清蛋白、抗血清同时存在时，几乎不与血清蛋白结合。人血清中的FT3抗原和一定量的125∣-T3X与限量的T3抗体竞争结合，形成抗原抗体复合物。加如免疫分离剂，使免疫复合物沉淀出来。离心后，抽弃上清液，用γ计数仪测量沉淀的放射性计数（cpm）。血清中FT3含量越高，试管中沉淀的cpm值越低；血清中FT3含量越低，试管中沉淀的cpm值越高。血清中FT3含量可通过标准曲线反算出来。 [步骤]ml 2、2小时内分离血清。 3、首先对试管标号：T（总计数），NSB（非特异结合），S0(最大结合)和S1至S6，QC（质控品）以及U（样本），然后按下表加样顺序操作。（单位μL） 试 管 试 剂 T NSB S0 S1-S6 QC U 零标准 100 100 标准品 100 质控品 100 样 本 100 标记物 100 100 100 100 100 100 蒸馏水 100 抗 体 100 100 100 100 摇匀后,37℃温育1小时 分离剂 500 500 500 500 500 摇匀后,室温放置15分钟;35