不同分子量壳寡糖对高脂糖尿病大鼠的果糖胺和血脂的影响.doc

不同分子量壳寡糖对高脂糖尿病大鼠的 果糖胺和血脂的影响 林强1*，王鑫1，2，葛喜珍1，桑帅1，高伟1 （1．北京联合大学生物化学工程学院，北京100023； 2．北京化工大学生命科学与技术学院，北京100029） 摘要 目的：探讨不同分子量壳寡糖对糖尿病大鼠的作用机制。方法：Wistar大鼠采用高脂高糖饮食同时腹腔注射链脲佐菌素复制糖尿病大鼠模型。将动物随机分为正常对照组、模型组、阳性对照和药物治疗组。给药两周后进行糖耐量试验。四周后处死大鼠取血清测定血糖、果糖胺和血脂各项指标。结果：与正常组比较，模型组血糖、果糖胺水平明显升高（P 0.01），血脂各项指标明显变化（P 0.01）。与模型组比较，治疗组各项指标有明显改善(P 0.05, P 0.01)，且这种作用具有剂量和分子量依赖性。结论：本模型大鼠血糖升高，并引起脂代谢紊乱，分子量1700的壳寡糖、大鼠日用剂量为140mg.kg-1适合高脂糖尿病患者，可降低血糖、调节血脂，起到保健作用。 关键词 壳寡糖；糖尿病；血糖；血脂；果糖胺 中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号: 糖尿病(diabetesmellitus，DM)病情严重或应激时可发生多种急性代谢性紊乱,研究和开发防治糖尿病及其并发症的药物越来越受到人们的重视。壳聚糖(chitosan)是以虾、蟹、昆虫的外壳或真菌类藻类等细胞壁提取的甲壳素经脱乙酰化反应而得到的一种纯天然多糖类有机聚合物，是自然界中存在的唯一丰富的碱性多糖。研究发现，壳聚糖可降低胆固醇，具有抗肿瘤活性、免疫调节作用和调理肠胃的功能[1]。壳寡糖(chitooligosaccharides,COS)是壳聚糖的降解产物，分子量小，溶于水，可被人体、动物及植物机体吸收利用，它不仅具有和壳聚糖相似的性质，而且一些生理活性或功能性质更加显著，如提高机体免疫力、抗肿瘤作用、调节血脂、作为促进双歧杆菌生长因子等，其降血糖作用国内外有相关报道[2]。但壳寡糖平均相对分子质量(Mr)在2000～10000之间，不同分子量和用药剂量的药理作用报道不一[3]。本研究拟探讨不同分子量壳寡糖的降糖作用机制，为壳寡糖开发成糖尿病易感人群或患者的保健食品或药品提供实验依据。 1 材料 1.1 实验动物 两月龄wistar清洁级雄性大鼠70只，体重150-200g，由军事科学动物中心提供。许可证号：SCXK-（军）2002-001。 1.2 实验仪器 TGL-16C低速离心机：上海安亭科学仪器厂；Thermo MK3型酶标仪：热电（上海）仪器有限公司；scoutⅡ半自动生化仪：德国scout公司；优越型血糖测试仪：德国罗氏公司；JA2003精密电子天平称：上海恒平科学仪器有限公司；HW.SY11-KD2C电热恒温水浴锅：北京长风仪器仪表公司。 基金项目：北京市教育委员会科技研究方向为。*通讯E-mail：@ tel：010-,通信地址北京朝阳区垡头西里三区18号北京联合大学生化学院 林强 收 邮编100023 1.3 药物与试剂 链脲佐菌素（streptozotocin，STZ） 2.3 指标检测 2.3.1　一般状态观察 观察各组大鼠的一般状况、采食、饮水量等。 2.3.2　糖耐量测定 给药两周后禁食12h，大鼠灌胃葡萄糖3g.kg，测定0h、0.5h、1h、2h的血糖值，计算曲线下面积。曲线下面积=0.5×0h血糖+0.5h血糖+1.5×1h血糖+2h血糖[4]。 2.3.3 血清指标测定 大鼠给药四周后，禁食12h用水合氯醛麻醉，心脏取血。分离血清，-70℃保存备测。葡萄糖测定采用葡萄糖氧化酶法；总胆固醇、甘油三酯采用酶比色法；高密度脂蛋白胆固醇采用清除法；果糖胺采用比色法；游离脂肪酸采用酶法；以上指标测定均严格按照试剂盒说明操作。 2.4 统计学处理 所有的数据用SPSS13.0 软件进行统计分析，所得数据用x±s表示，组间差异采用t检验。 3 结果 3.1 一般状态观察 注射STZ后72h，DM大鼠逐渐出现多饮、多尿、多食,脱毛、消瘦、活动减少等。拜唐苹组和1700壳寡糖对DM大鼠的一般状态都有明显的改善，可显著改善大鼠体重减轻、多饮、多食等症状，高剂量组症状改善明显。3000壳寡糖组在一定程度上改善糖尿病大鼠体重减轻、多饮、多食等症状，但效果不明显。 3.2 壳寡糖对DM大鼠糖耐量的影响 模型组与正常组比较，0小时、0.5小时、1小时、2小时血糖和曲线下面积明显升高（p0.01），治疗组与模型组相比，均有不同程度降低，拜糖平组和1700壳寡糖高剂量组的血糖水平、曲线下面积与模型组相比明显降低，在空腹和2h时血糖水平、曲线下面积差异有显著性（p0.01），但仍高于正常组。1700低剂量组和3000壳寡糖组与模型组相