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1 引 言 2 RNA聚合酶 3 启动子与增强子 4 RNA转录的基本过程 5 原核生物与真核生物mRNA的特征比较 6 小 结 重点内容： ① 基本概念：中心法则、转录、翻译、DNA编码链、DNA模板链、启动子、增强子、终止子、基因、转录起始点、RNA聚合酶、内源性终止子、ρ因子、抗终止； ② 转录产物的类型及其生物学功能； ③ 大肠杆菌RNA聚合酶的基本组成； ④ 真核生物RNA聚合酶的种类及其生物学功能； ⑤ RNA酶促合成的基本特征； ⑥ 启动子与增强子的作用特点； ⑦ RNA合成的基本过程--起始、延伸及终止全过程； ⑧ 大肠杆菌的两种终止子及作用机理； ⑨ 原核生物与真核生物mRNA的特征比较 了解内容： ① 细菌RNA聚合酶的形成过程； ② 细菌RNA聚合酶的三维结构； ③ 酵母RNA聚合酶Ⅱ的晶体结构； ④ RNA合成的抗终止机理。 1.1 中心法则 1.2 转录和翻译 1.3 转录产物的类型 1.4 DNA转录序列的区分 1.5 基因表达盒结构组成 (1) DNA序列是遗传信息的贮存者，通过自主复制得到永存； (2) DNA通过转录生成RNA; (3) 含遗传信息的mRNA通过翻译生成蛋白质来控制生命现象； (4) 同时某些RNA可以通过逆转录将遗传信息传到DNA； (5) 某些RNA自身还可进行复制使其遗传信息得以永存。 1.2 转录和翻译 (transcription translation) 转录： 从DNA到RNA的过程，基因表达的核心步骤。 翻译： 从RNA到蛋白质的过程，基因表达的最终目的。 ◆信使RNA (messenger RNA, mRNA) ◆转移RNA (transfer RNA, tRNA) ◆核糖体RNA (ribosomal RNA, rRNA) ◆其他一些小RNA（small RNA, sRNA) 2.1 原核生物RNA聚合酶 2.2 真核生物RNA聚合酶 2.1 原核生物RNA聚合酶 2.1.1 细菌RNA聚合酶的结构组成 有四种不同类型的亚基； 在不同的菌种之间，α、β和β` 亚基的大小相似，但σ亚基的变化较大。 2.1.2 细菌RNA聚合酶的形成过程 α2+β→α2β α2β+ β` → α2ββ` (core enzyme) α2ββ` +σ →α2ββ`σ(Holoenzyme) 大肠杆菌RNA聚合酶的核心酶除含有4个多肽亚基外，还含有2个Zn原子 有关RNA聚合酶的几个知识点： 只有全酶才能在正确位置起始转录。核心酶能在DNA模板上合成RNA，但不能在正确位置起始转录。 σ因子仅能保证细菌RNA聚合酶稳定地结合到启动子上，它通常在RNA链合成8~9个碱基后释放。 2.2 真核生物RNA聚合酶 2.2.1 细胞核中RNA聚合酶的种类 3.1 启动子与增强子的定义3.2 启动子与增强子的结构比较3.3 启动子与增强子的作用特点3.3 启动子与增强子边界及关键序列元件的实验确定3.4 原核生物启动子3.5 真核生物启动子 3.1 启动子与增强子的定义 启动子(Promoter)： 位于转录起始点附近，且为转录起始所必需的序列元件。能活化RNA聚合酶，使之与模板DNA准确地相结合并具有转录起始的特异性。 增强子(Enhancer)： 位于离转录起始点较远的位置上，具有参与激活和增强转录起始功能的序列元件。 3.3 启动子与增强子的作用特点 3.3.1 启动子的作用特点 （1）一个基因可同时拥有一个及以上启动子 （2）启动子位置不定，一般在转录起始点上游。 （3）可与增强子共同控制转录起始和强度。 （4）发挥功能时除需RNA聚合酶外，还需转录调控因子与启动子区各种调控元件相互作用 3.4 启动子与增强子边界及关键序列元件的实验确定 以启动子为例 边界序列确定: 从一段特定的含有启动子的DNA片段入手，从DNA的两侧不断缩短长度直至短到停止产生活性的某一位置。 保守序列确定： A: 对已知启动子序列，可通过缺失或突变确定哪些碱基为必需； B: 还可通过比较不同的启动子间的同源性，确定哪些序列为保守序列。 3.5 原核生物启动子 3.5.1 -10区和-35区的结构特征 --- TTTACA----TATGTT---- TTGACA TATAAT (-35 ) (-10)