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* * 实验二 动物DNA提取 一、目的要求 学习和掌握从动物组织中提取核酸的原理和技术 二、实验原理 在浓氯化钠(1-2mol/L)溶液中,脱氧核糖核蛋白的溶解度很大,核糖核蛋白的溶解度很小。在稀氯化钠(0.14mol/L)溶液中,脱氧核糖核蛋白的溶解度很小,核糖核蛋白的溶解度很大。因此,可利用不同浓度的氯化钠溶液,将脱氧核糖核蛋白和核糖核蛋白从样品中分别抽提出来。 将抽提得到的核蛋白用SDS(十二烷基磺酸钠)处理,DNA(或RNA)即与蛋白质分开,酚-氯仿-异戊醇将蛋白质沉淀除去,而DNA则溶解于溶液中。向溶液中加入适量乙醇,DNA即析出。 三、器材及试剂 1.实验材料: ①新鲜猪肝(一次用不完一定要冷冻保存。提取动物组织DNA,一般选择细胞膜较脆弱,容易破碎的动物脏器,如胸腺、肝脏、脾脏、胰脏、精子等。) ②研钵 ③离心机 ④微量移液器 ⑤水浴锅 ⑥纱布 2.实验药剂: ①提取液(0.14mol/L NaCl,0.10mol/L EDTA) ②25%SDS ③5mol/L NaCl ④酚-氯仿-异戊醇混合液 ⑤ 3mol/L NaAC ⑥预冷的无水乙醇(异丙醇) 70%乙醇 *
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