细胞培养-缩减版.pptVIP

实验六 细胞培养技术 实验原理 ㈠ 贴附生长型细胞 ㈡ 悬浮生长型细胞 仪器及耗材 超净工作台 CO2培养箱 CO2培养箱设定的条件为 37℃，5％CO2 。 提供的3个环境： 温度，气体，湿度 培养瓶和培养板 消化液 培养基 血清 实例 报告要求 * 生物教研室 朱力宇 一、 什么是细胞培养？ 体外培养（In vitro） ** 细胞培养 ： 指从体内取出组织、细胞在体外模拟体内生理环境，在无菌、适当温度和一定的营养条件下，使之生存和生长，并维持其结构和功能特性。 原代培养：直接取材于有机体组织的细胞培养。 传代培养：将培养细胞转移到新的容器中，以1：2的比例继续培养。 制备游离细胞悬液 胰蛋白酶、胶原酶、EDTA，破坏细胞间连接 分离出不同 类型的细胞 原代培养 传代培养 细胞培养 细胞分离 1、离心 2、利用细胞自身的黏附力 3、抗体吸附 4、流式细胞仪（FCM） 5、其他 生化分析 二、培养细胞的生长方式及类型 成纤维样细胞 上皮样细胞： 都可连成单层 悬浮生长型细胞 三、培养细胞的条件 1 营养需要 3 无毒及无污染 2 环境要求 生 存 环 境 温度 气相 PH 细胞培养室 CO2培养箱 超净工作台 倒置相差显微镜 倒置显微镜 培养基及试剂 扫描电镜法显示支原体，附于细胞表面众多的圆形颗粒为支原体 污染问题 1.支原体污染 2.细菌污染: 能改变培养液的pH值，使培养液变混浊。 细菌生长迅速，能消耗营养液和产生毒素。 抑制细胞的生长，毒性大的细菌可很快导致细胞崩解死亡。 细菌 细胞 3.真菌污染 干预因素： 药物、 毒物、 物理因素、 生物作用、 相互作用、 其他 直接分离的细胞 原代培养的细胞 传代培养的细胞 可能的结果 1、…… 2、…… 3、…… 例如：三氧化二砷对白血病细胞的作用 各种实验 *