发酵工程 复习题.doc

第一章 1、发酵工程：采用现代工程技术手段，利用生物细胞的特定功能生产各种特定的有用物质，或直者接把微生物应用于某些工业生产的一种生物技术体系。 2、生物细胞：微生物细胞和动植物细胞及其固定化细胞，主要是微生物细胞，故发酵工程又称微生物工程。 3、发酵工程完整的工艺流程 第二章 1、初级代谢：把营养物质转化为机体结构和生理活性物质以及提供能量的代谢作用。 2、次级代谢：在一定生理阶段出现的一种特殊代谢，是某些微生物为避免代谢过程中某些代谢产物积累造成的不利作用而产生的一类有利于生存的代谢类型。一般在在菌体生长后期产生。 3、初级代谢产物：通过初级代谢途径产生微生物生长所必需的代谢产物. 一般在菌体对数生长期所产生。中间代谢产物、前体物、高分子物质及能量代谢和代谢调控中起作用的物质。 4、次级代谢产物：通过次级代谢合成的产物，对微生物本身无明显生理作用或对自身生长非必须，但对产生菌的生长可能有一定价值。一般在生长后期（稳定期）合成。如抗生素、生物碱、色素、激素、毒素等。 5、工业发酵生产菌种来源：从自然界中分离筛选、从菌种保藏机构索取或购买、从生产过程中已有菌种中筛选发生正突变的优良菌种。 6、富集培养常用方法：有调节培养基营养成分和控制培养条件两类。 7、常用纯种分离方法：划线分离法（简单，较快）、稀释分离法（关键步骤是制备单孢子或菌体悬浮液，稀释法分离的菌落单一均匀，获得纯种概率大特别适用于分离蔓延性微生物）和组织分离法（适用于分离高等真菌）。 8、利用平板的生化反应进行分离筛选方法：变色圈法、透明圈法、生长圈法、抑菌圈法 9、毒性实验：微生物中除啤酒酵母、脆壁酵母、黑曲霉、米曲霉和枯草杆菌作为食用无需做毒性实验外，其它微生物作为食用，需通过2年以上毒性实验。 10、诱变处理主要采用物理诱变剂和化学诱变剂。目前常用的物理诱变剂有紫外线、γ射线，化学诱变剂有硫酸二乙酯、N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍（NTG或MNNG）和亚硝基甲基脲（NMU），后两种成为超诱变剂。 11、基因工程育种：用人工方法取得或合成的供体DNA基因在体外重组于载体（病毒、细菌质粒或其他）DNA上，将目的基因转移至受体细胞并使其在受体细胞系统内进行复制、转录和翻译，表达出供体基因原有遗传性状的方法。 12、菌种保藏的原理：①基本原理：根据菌种生理生化特性，人为创造条件，使微生物代谢处于不活泼、生长繁殖受到抑制的休眠状态，以减少菌种的变异。 ②方法要点 挑选典型菌种的优良纯种：一般采用微生物的休眠体（如孢子、芽孢等） 创造适于微生物长时期休眠的环境条件：干燥、低温、缺氧、避光、缺乏营养以及添加保护剂或酸碱中和剂等，使菌种代谢活动处于最低状态。 13、菌种保藏方法：斜面低温保藏法、液体石蜡覆盖保藏法、沙土管保藏法、悬液保藏法、真空冷冻干燥保藏法、低温保藏法、液氮超低温保藏法。 14、广义复壮：是指在菌种的生产性能未衰退前就有意识的进行纯种的分离和生产性能测定工作，以期菌种的生产性能稳定或逐步提高。实质是利用自发突变（正变）不断地从生产中选种。 第三章 1、碳源：碳源作用：构成菌体和产物的碳架及能量来源。 分类：按菌体利用速率，分为速效碳和缓效碳。 来源：糖类、油脂、有机酸、醇及碳氢化合物等 2、油脂的作用：加入的油脂既能消泡又有补充碳源的作用。 3、生长因子：一类微生物维持正常生活不可缺少，但细胞自身不能合成或合成量不足以满足机体生长需要的微量有机化合物。广义上讲，凡是微生物生长不可缺少的微量的有机物质，如氨基酸、嘌呤、嘧啶、维生素等均称生长因子。狭义讲指维生素。 4、葡萄糖效应：过多的葡萄糖加速菌体的呼吸，使培养基中氧不能满足需要，导致一些中间代谢产物（丙酮酸、乳酸、乙酸等）积累在培养基中而使pH下降，影响酶活性而抑制微生物生长和产物的合成的现象。 5、培养基按用途分类：孢子培养基、种子培养基、发酵培养基 6、培养基设计的一般思路：（1）参照前人所使用较适合某一类菌种的经验配方、结合所采用的菌种特性和后提取工艺要求，初步确定可能的培养基成分。（2）通过单因子试验摇瓶确定最适培养基成分。（3）常用正交设计在摇瓶水平优化培养基配方，得各成分最适浓度。（4）中、小试发酵罐规模进一步优化配方。（5）生产规模优化培养基配方。 7、微生物生长所需的营养物质：碳源、氮源、无机盐类、微量元素、生长因子、水等。 第四章 1、灭菌的方法：热灭菌法、辐射灭菌、化学药品灭菌法、过滤除菌法等 2、分批灭菌：每批培养基全部流入发酵罐后，在罐内通入蒸汽加热至灭菌温度，维持一定时间，再冷却到发酵要求温度工艺过程，又称实罐灭菌（实消，原因：对发酵罐灭菌时,罐里有培养基）。 3、连续灭菌：培养基在发酵罐外经过一套灭菌设备直接用蒸汽进行灭菌，冷却后送入已灭菌发酵罐内的灭菌工艺流程,又称连消