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学案49 基因工程
考纲要求 1.基因工程的诞生(Ⅰ)。2.基因工程的原理及技术(Ⅱ)。3.基因工程的应用(Ⅱ)。4.蛋白质工程(Ⅰ)。
一、基因工程的概念
基因工程:又叫做________技术或________技术,是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以________,然后放到另一种生物的细胞里,________地改造生物的遗传性状。
二、基因工程的操作工具
1.限制性核酸内切酶——“分子手术刀”,又称为________。
特点:能够识别DNA特定的______________,切开两个________之间的____________。
限制酶切割DNA产生的末端有两种形式:__________和________。
2.DNA连接酶——“分子缝合针”
作用:将双链________“缝合”起来,恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的____________。
3.基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”
(1)常用载体:____。
(2)质粒载体的特点:①能够在细胞内________并稳定保存。②具有一个或多个________________,便于外源DNA片段插入其中。③具有特殊的________,供重组DNA的鉴定和选择。
三、基因工程的基本操作程序
1.目的基因的获取:(1)从______________中获取;(2)利用____________扩增目的基因;(3)________合成。
2.____________的构建(核心)
(1)目的:使________基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传至下一代,使目的基因能够表达和发挥作用。
3.将目的基因导入受体细胞(转化)
(1)将目的基因导入植物细胞:常用方法有__________法、基因枪法和__________法。
(2)将目的基因导入动物细胞:常用方法是________法。
(3)将目的基因导入微生物细胞:受体细胞
4.目的基因的________与________。
探究点一 基因工程的概念及操作工具
1.基因工程的概念是什么?
2.完成理解基因工程的操作工具比较表:
项目 限制性核酸内切酶(分子手术刀) DNA连接酶(分子缝合针) 运载体(分子运输车) 特性或条件 识别特定的______序列,并在__________切割DNA分子 一般作用于两条具有相同的______的DNA分子 能够在宿主细胞中____并稳定____;具有一个或____个限制酶切位点;具有____基因 作用 提取____基因,切割____ 构建重组DNA分子 将________转移到宿主细胞中并大量复制 结果 将DNA分子切成DNA片段,产生____末端 相同的黏性末端之间形成________键 形成重组________ 思维拓展
1.对基因工程概念的理解
别名 基因拼接技术或DNA重组技术 操作环境 生物体外 操作对象 基因 操作水平 DNA分子水平 基本过程 剪切→拼接→导入→表达 结果 人类需要的基因产物 与杂交育种相比 克服远缘杂交不亲和的障碍 与诱变育种相比 定向改造生物性状 原理 基因重组 2.在切割目的基因和载体时要求用同一种限制酶,目的是产生相同的黏性末端。
3.将一个基因从DNA分子上切割下来,需要2个限制酶,同时产生4个黏性末端。
4.不同DNA分子用同一种限制酶切割产生的黏性末端都相同,同一个DNA分子用不同的限制酶产生的黏性末端可能相同。
探究示例1 (2010·全国理综Ⅱ,5)下列叙述符合基因工程概念的是( )
A.B细胞与肿瘤细胞融合,杂交瘤细胞中含有B细胞中的抗体基因
B.将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌,获得能产生人干扰素的菌株
C.用紫外线照射青霉菌,使其DNA发生改变,通过筛选获得青霉素高产菌株
D.自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上
听课记录:
探究点二 基因工程的基本操作程序
1.完成基因工程的基本操作流程图:
2.完成目的基因的检测与鉴定表,并加以理解、掌握:
类型 步骤 检测内容 方法 分
子
水
平 第一步 目的基因是否插入受体细胞染色体的DNA上 ________________(DNA和DNA之间) 第二步 目的基因是否转录出mRNA ________杂交技术(DNA和mRNA之间) 第三步 目的基因是否翻译出蛋白质 蛋白质分子杂交(______________杂交法) ____水
平鉴定 ____法或____法 思维拓展
1.在整个工程中,只有第三步将目的基因导入受体细胞过程中不发生碱基互补配对,其他步骤均发生配对。
2.切割质粒和目的基因的限制酶必须是同一种酶,以获得相同的黏性末端,利于基因表达载体的构建。
3.插入的目的基因只是结
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