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IDGM与2DDGF(直接二维拟合）的比较分析 单分子定位算法精度分析一 IDGM和2DDGF算法的运算时间比较 (a) (b) (a) Biasp；(b) ?p IDGM和2DDGF算法的Biasp和?p随SNR变化关系 对于相同处理量的荧光图像序列，IDGM算法不仅运算时间短，约为2DDGF的1/10； 其计算值的准确度和精密度更高。 对于相同处理量的荧光图像序列，IDGM算法不仅运算时间短，约为2DDGF的1/10； 其计算值的准确度和精密度更高。 3/5：一种高精度快速的荧光单分子跟踪算法 仿真过程中的一条轨迹 3/5：一种高精度快速的荧光单分子跟踪算法 仿真与实验 荧光单分子跟踪研究的真空设备 3/5：一种高精度快速的荧光单分子跟踪算法 超高真空系统整体示意图 1)超高真空腔；2)真空阀门；3)传输真空腔；4)衬底/样品传输机构；5)涡轮分子泵（下接旋转机械泵）；6)分子蒸发源接口；7)椭偏仪接口；8)线性驱动真空波纹管；9)样品架；10)反射差分光谱仪接口；11)结构架；12)支撑柱；13)钛升华泵；14)悬挂弹簧；15)离子泵；16)液氦低温冷头；17)x-y平面移动平台；18)荧光显微镜；19)CCD摄像机 真空系统装配实物图 荧光单分子跟踪研究的真空设备 3/5：一种高精度快速的荧光单分子跟踪算法 5/5：总结及思考题 1、荧光及其特性； 主要内容 2、 荧光显微技术、探测传感器以及荧光显微术应用领域； 3、荧光单分子检测特点、应用范围和关键技术； 4、一种快速高精度的单分子跟踪算法的实现过程、特性评价及典型的单分子研究装置。 总结 思考题 5/5：总结及思考题 1、什么是荧光？它有哪些主要特点？ 2、荧光如何从激发光中分离出来，它有那么主要的探测器件？ 3、单分子检测的应用领域有哪些？ 4、单分子跟踪算法分为几个重要步骤？ 5、IDGM（图像去噪高斯掩膜）与2DDGF（二维直接高斯拟合）算法相比，有什么优势？ 6、荧光显微技术如何实现与真空分子生长（蒸发）技术的耦合？ 荧光及其荧光单分子跟踪技术.ppt * * * 中国石油大学信息与控制工程学院 中国石油大学信息与控制工程学院 荧光及其荧光单分子跟踪技术 2011.11 鄢志丹 荧光 什么是荧光；分子荧光的主要特性有那些； 荧光显微技术 荧光显微镜；探测传感器；荧光显微技术的应用领域； 荧光单分子检测技术 单分子检测意义；荧光单分子检测特点、应用范围和关键技术； 一种高精度快速的荧光单分子跟踪算法 图像去噪；位置估计；伪点剔除；精细定位；轨迹生成；特性评价；真空设备； 总结及思考题 主要内容: 思考题 思考题 1、什么是荧光？它有哪些主要特点？ 2、荧光如何从激发光中分离出来，它有那么主要的探测器件？ 3、单分子检测的应用领域有哪些？ 4、单分子跟踪算法分为几个重要步骤？ 5、IDGM（图像去噪高斯掩膜）与2DDGF（二维直接高斯拟合）算法相比，有什么优势？ 6、荧光显微技术如何实现与真空分子生长（蒸发）技术的耦合？ 荧光 荧光（ 1852年，英国科学家Stokes) ： 1/5：荧光（Fluorescence） 光致发光： 某些分子受外界可见光或紫外线激发 而出射光子的现象； 荧光和磷光： 激发态电子排布和光子发射路径不同； 荧光发射过程： 吸收、内转移、振动驰豫、荧光发射 磷光发射：系间窜越 分子荧光发射能量图 光致发光 分子荧光特性： 1/5：荧光（Fluorescence） 量子跳跃特性： 发射——暗态交替的量子跳跃过程；在实验中可观察到单分子荧光强度和荧光光谱的涨落； 荧光偏振特性： 单个荧光分子因其具有唯一的固有荧光和吸收跃迁偶极矩， 因而只吸收那些偏振方向与其吸收跃迁偶极矩方向一致的 光子，并发出具有一定偏振方向的荧光； Stokes平移 能量间隙 Stokes平移： 发射光谱和激发光谱； 荧光发射光谱较之 激发光谱会产生红移； 分子荧光特性： 1/5：荧光（Fluorescence） 荧光饱和和荧光淬灭： 荧光饱和：当激发光强增加到一定程 度后，若持续增加激发光强，发射的 荧光强度不但不增加，反而会减小。 荧光淬灭：荧光分子在与某些物质作 用下，出现发射荧光减弱甚至消退的 现象。 真空中的p-6P分子连续荧光光谱 p-6P分子荧光光谱淬灭 荧光低温特性： 在低温环境下，由于分子的转动能、振动能 及其多普勒效应大大减少，其荧