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* 培养基是提供微生物生长繁殖和生物合成各种代谢产物所需要的、按一定比例配制的多种营养物质的混合物。P64-2 * * P65 * * * * * * P69 * P69 * * * * * * * P73-75 * P73 * P73 * P76 Company Logo 授课教师:唐小春 动物生物技术系 吉林大学畜牧兽医学院 Company Logo 第一节 概 述 培养基是提供微生物生长繁殖和生物合成各种代谢产物所需要的、按一定比例配制的多种营养物质的混合物。 一、培养基的组成 分批发酵工艺:每个阶段的培养基不同 菌种发芽生长 扩大菌体繁殖 发酵罐内的菌体生长 产物合成 Company Logo (合成培养基) (复合培养基) (复合培养基) (复合培养基) Company Logo 第一节 概 述 二、培养基条件与微生物生理学和形态学的相关性 培养基条件: 是指培养基组成、pH值、二价阳离子、阴离子聚合物、表面活性剂和固形物含量。 Company Logo 二、条件与微生物生理学和形态学的相关性 碱性培养基中:产黄青霉菌的菌丝体短而粗,易成球状体。 培养基中加海藻酸或甲基纤维素能诱发产黄青霉菌和黑曲霉菌的菌丝体呈丝状体生长。 二价阳离子促进菌丝体呈球状,用阴离子聚合物可以阻止二价阳离子的影响。 锰能改变黑曲霉菌细胞壁的成份。 柠檬酸发酵中(黑曲霉菌)和衣康酸发酵中(土曲霉菌),球状体的菌丝体产酸最高,而产黄青霉菌发酵青霉素时,丝状体的产量最高。 生物素改变细胞膜的通透性,减少反馈抑制。(谷氨酸发酵) 青霉素抑制G+菌细胞壁形成,而改变细胞的通透性。 表面活性剂改变细胞的通透性。(酶制剂发酵) Company Logo 三、配制工业发酵培养基的一般要求 1.营养物质组成丰富、浓度适当,满足不同时期的菌体生理需要。 2.在一定条件下,各种材料间不能产生生化反应,理化性质相对稳定。 3.粘度适中,具有适当的渗透压 4.考虑所选材料与代谢产物合成过程的关系,使主产物合成达到最高速率,不需要的产物的合成降至最低。 5.生产过程中既不影响通气与搅拌的效果,又不影响或少影响产物的分离精制和废物处理。 6.大规模生产时要考虑材料的成本。 Company Logo 第二节 培养基的成分 碳源 氮源 无机盐和微量元素 水 前体 促进剂和抑制剂 消沫剂 Company Logo 一、碳源 凡是用于构成微生物细胞和代谢产物中碳素的营养物质均称为碳源。一般占菌体干重的50%,它既是构成菌体细胞和代谢产物的主要元素,又是提供微生物生命活动中所需能源的原料。主要有糖、脂、醇、有机酸其它碳氢化合物。 葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖、糊精、淀粉等是细菌,放线菌,霉菌,酵母善于利用的碳源,几乎所用微生物都能利用葡萄糖。但是会引起葡萄糖效应。 葡萄糖效应:在过多葡萄糖的情况下,葡萄糖不完全氧化的中间产物如丙酮酸、乳酸等会导致培养基的pH下降,从而影响微生物的生长和产物的合成。 蔗糖、麦芽糖、乳糖等双糖常用于抗生素、氨基酸、有机酸、酶类等的发酵,可用其纯化产品,也可用其糖蜜和乳清。 糊精、淀粉等多糖可克服葡萄糖效应。且来源丰富、价格低廉。 脂类一般在培养基中糖类物质缺乏或微生物生长的某个阶段,微生物可利用其生长。 碳酸气、石油、石蜡、天然气、甲醇、乙醇等石油化工产品 二、氮源 是指构成微生物细胞和代谢产物中的氮素的营养物质。是微生物发酵中使用的主要原料之一,当培养基中碳源不足时,可作为补充碳源。主要分为有机氮源和无机氮源。 常用的有机氮源:黄豆粉、花生饼粉、棉籽饼粉、玉米浆、蛋白胨、酵母粉、鱼粉、菌丝体、酒糟等(含丰富的蛋白质、多肽、游离氨基酸,糖类脂肪、无机盐、维生素及生长因子等,微生物生长迅速)。 有机氮源除了含有丰富的蛋白质、肽类、游离的氨基酸外,还含有少量的糖类、脂肪、无机盐和生长因子等,是较理想的营养物质。 微生物对氨基酸的利用是有选择性的,如缬氨酸既可用于红霉素链霉菌的生长,又可以氮源的形式参加红霉素的生物合成。在螺旋霉素发酵中,发酵培养基里加入L-色氨酸可使螺旋霉素的产量显著提高,但L-赖氨酸则完全抑制螺旋霉素的生物合成。 黄豆粉是发酵工业最常用的有机氮源,棉籽粉的应用也较广泛。 生产中常用的玉米浆、麸质粉是玉米淀粉生产过程中的副产物。由于它们的质量波动较大,因而应用受到限制。 有机氮源成分复杂可以从多个方面对发酵过程进行影响,而另一方面有机氮源的来源具有不稳定性。所以在有机氮源选取时和使用过程中,必须考虑原料的波动对发酵的影响。 无机氮源:成分单一,质量较稳定。 铵盐中的氮与细胞中有机氮化合物中的氮处于相同的氧
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