一种基于荧光标记DNA的银离子检测方法.docVIP

  一种基于荧光标记 DNA 的银离子检测方法# 刘林，翁小成** （武汉大学化学与分子科学学院，武汉，430000） 5 10 15 20 25 30 35 摘要：DNA 的独特的碱基互补配对方式和可控多变的结构使其作为一种工具分子而应用于 医学、材料学和生物学等许多领域。通过和银离子的反应，经过荧光标记的 DNA 的二级 结构得到改变，从而控制它在荧光淬灭剂——石墨烯的表面吸附或脱附，由此产生荧光信 号的改变，达到检测银离子的目的。 关键词：DNA，石墨烯，银离子检测 中图分类号：Q52 A method of Ag+ detection based on labeled DNA LIU lin, WENG xiaocheng (College of Chemistry and Molecular Sciences, Wuhan University,430000) Abstract: DNA can be used as a tool molecule in many fields such as medical, material and biology due to its unique base-pairing way and controllable, changeful structure. Through interacting with Ag ion, the secondary structure of labeled DNA changes. It can adsorpt or separate from the surface of the fluorescence quencher—graphene oxide and leads to the change of fluorescence signal. So it can be used to detect Ag ion. Key words: DNA, graphene oxide, detection of Ag ion 0 引言 自 1953 年 DNA 的双螺旋结构被提出以来，人们对它的研究日益深入，除了作为遗传 物质基础参与到各种生命活动中之外，其独特的构成和碱基之间互补配对的能力使其能够形 成多种多样的二级结构，对这些二级结构的调控转变使 DNA 成为一种生物工具分子而广泛 应用于纳米机器、生物芯片等多个领域[1,2]。例如作为一种生物分子探针对一些小分子化合 物或者重金属离子的检测，这在环境卫生和食品安全方面有实际应用的价值[3]。 银是一类广泛使用的重金属，它很早就被制作成货币和各种装饰品用于人们的日常生 活，在工业方面则用于冶金、电镀、影印和合成各种银盐等，在医学上则用作一些抗菌消炎 药品的生产[4-6]。银本身是人体内的微量元素之一，微量的银对人是无害的，但含银的化合 物的过度使用无疑会造成环境的污染，对人们的生命健康造成威胁，WHO 规定了银在 0.05 ppm 以下对人体才是安全的，银离子在饮用水中的限量为 0.05 mg/L，因此发展银离子的检 测手段是很有必要的。 一些研究报道了胞嘧啶 C 能与 Ag+的特异性结合，由此发展了一系列基于 C- Ag+-C 的 结合模式的 Ag+检测手段[7,8]。而在最近几年里，有报道 Ag+可以和 G 碱基的 N7 位和 C6O 基金项目：高等学校博士学科点专项科研基金（200804861034） 作者简介：赖涵（1989-），女，硕士研究生 通信联系人：翁小成（1981-），男，副教授，主要研究方向：小分子对特殊结构核酸的识别与调控. E-mail: xcweng@whu.edu.cn -1-   位发生螯合[9,10]，因此我们考虑可以利用 Ag+来调控 DNA 的二级结构，达到检测 Ag+的目的。 我们设计了如下图所示的一个银离子检测体系，这个体系构筑在石墨烯（GO）和荧光 40 45 50 55 60 65 标记的 DNA 的基础上。很多报道一些纳米尺寸的材料例如金纳米离子、石墨烯等能够和单 链 DNA 很好的结合，但是和双链、G-四链体及一些其他的二级结构 DNA 的结合却很差[11-13]， 因此在单链状态下，DNA 与 GO 相互结合，DNA 上的荧光被 GO 淬灭（图 1a），加入银离 子后，银离子和 DNA 相互作用，使 DNA 形成二级结构从 GO 表面脱离，从而使体系荧光 得到恢复，这一由荧光 off 到荧光 on 的过程可以被设计用来检测银离子（图 1b）。 图 1. 基于荧光标记 DNA 的银离子检测体系原理图 1 实验部分 1.1 材料和仪器 DNA：5′(TAMRA)-TTTTTAGGGCGGGTTGGGAAA-3′购于上海 Invi