骨髓间充质干细胞分化成骨细胞中Notch信号的研究.doc

  骨髓间充质干细胞分化成骨细胞中 Notch 信 号的研究# 牛萍1，赵月强2* 5 10 15 20 （1. 武汉大学人民医院儿科，武汉 430060； 2. 武汉大学人民医院整形外科，武汉 430060） 摘要：目的 研究骨髓间充质干细胞分化为成骨细胞过程中 Notch 信号表达的情况。方法 用 密度梯度离心法分离培养犬骨髓间充质干细胞。观察干细胞增殖及传代情况。单独培养的干 细胞为对照组,实验组将骨髓间充质干细胞诱导分化为成骨细胞, 用 RT-PCR、MTT 方法等 检测干细胞分化为成骨细胞的情况,及干细胞在增殖与分化为成骨细胞过程中 Notch 信号系 统的表达情况。结果 骨髓间充质干细胞呈梭形、旋涡样生长，增殖及传代能力强，并可诱 导分化为成骨细胞。逆转录聚合酶链反应显示实验组成骨诱导因子表达上调，有 Notch 信号 通路受体及配体的表达，而对照组表达微弱。结论 骨髓间充质干细胞在增殖及分化过程中 存在 Notch 信号通路，在干细胞分化为成骨细胞过程中 Notch 信号系统的表达上调。 关键词：信号通路；干细胞；分化 中图分类号：R329 The study of regulation of signaling system in the differentiation of mesenchymal stem cells into osteoblasts NIU Ping, ZHAO Yueqiang (Renmin Hospital of Wuhan University, WuHan 430060) Abstract: Objective To investigate the regulation of the differentiation of mesenchymal stem cells(MSCs) into osteoblasts. Methods MSCs were isolated from canine bone marrow and cultured with cell culture technique，then osteoblasts differentiation wad induced. The identification of 25 differentiation of MSCs and Notch signal was carried out by RT-PCR methods．MTT method was used to calculate the growth curve. Results MSCs looks fusiform under light microscope. MSCs can differentiate into osteoblasts. RT-PCR showed that the protein of Notch signal expressed during differentiation, and the level of expression was significantly lower during proliferation. Conclusion Notch signaling system lies in the proliferation and differentiation of 30 35 40 mesenchymal stem cells. And its expression increased during the differentiation of mesenchymal stem cells into osteoblasts. Keywords: Signal pathway; Stem cells; Differentiation 0 引言 骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell，MSC)是一种位于骨髓中具有自我更新、分 化增殖和多向分化潜能的干细胞，其在特定微环境及适宜的细胞因子的作用下，可分化成多 种组织细胞，已成为组织工程、细胞及基因治疗的理想的靶细胞。并且由于其低免疫原性， 在组织构建和再生医学中得到了广泛运用[1-3] 。因此 MSC 已成为组织工程、细胞及基因治 疗理想的靶细胞。找到与骨髓间充质干细胞增殖与分化相关的信号通路，通过精确调控信号 通路，来诱导干细胞向特定的细胞系分化，就可为组织构建提供大量的功能细胞，具有重要 的临床意义。在调节骨髓间充质干细胞分化的诸多机制中，Notch 信号途径已经逐渐引起关 注。它是影响细胞命运的、保守而重要的信号通路之一。有研究表明 Notch 信号系统几乎涉 及所有细胞的增殖、分化活动，其通过临近细胞间的相互作用