B23通过抑制Eg5 ATP酶活性抑制Eg5对微管的解聚.docVIP

  B23 通过抑制 Eg5 ATP 酶活性抑制 Eg5 对 微管的解聚# 汪国兴，高翔，姚展，黄韵，史庆华，吴缅** 5 10 15 20 25 30 （中国科学技术大学生命科学学院，合肥微尺度国家实验室，合肥 230027） 摘要：Nucleophosmin/B23 作为一种核仁中广泛存在的蛋白，在细胞增殖和细胞生长等多种 生命活动中起重要的调节作用。然而，B23 蛋白对于微管动力学的调控作用却极少见报道。 本文主要研究 B23 蛋白直接与 kinesin 蛋白家族成员 Eg5 蛋白发生作用，并通过直接抑制 Eg5 蛋白的 ATP 酶活性进而抑制 Eg5 对微管的解聚。 关键词：Eg5；Nucleophosmin/B23；ATP 酶活；微管动力学 中图分类号：Q7 B23 inhibits Eg5-mediated microtubules depolymerization via inactivating its ATPase activity Wang Guoxing, Gao Xiang, Yao Zhan, Huang Yun, Shi Qinghua, Wu Mian (Hefei National Laboratory for Physical Sciences at Microscale and School of Life Sciences, University of Science and Technology of China, HeFei 230027) Abstract: Nucleophosmin/B23, an abundant nucleolar protein, plays multiple roles in cell growth and proliferation, and yet, little has been studied about its function in regulating dynamics of microtubules.Here, we report that B23 directly interacts with Eg5, a member of the kinesin family, in the cytosol. The DNA/RNA binding domain of B23 and the motor domain of Eg5 were found to be involved in their interaction. Both in vivo and in vitro evidences showed that B23 acts as an upstream regulator of Eg5 in promoting microtubule polymerization. Moreover, we further demonstrated that B23 regulates microtubule dynamics by directly inhibiting Eg5 ATPase activity. Keywords: Eg5; Nucleophosmin/B23; ATPase; microtubule dynamics 0 引言 微管（MT）的生长与消失，是微管动力学的两种主要状态,这两种状态是不断改变的。 微管从生长到消失的过程称为解聚（catastrophe）,而从消失到生长的过程称为恢复（rescue） [1] Eg5(也被称之为 kinesin-5, KIF11)是一种马达蛋白，属于 kinesin-like 蛋白家族，该蛋白最近 被报道参与了长度依赖型微管聚集的调控[2] [3] 形成浓度梯度并水解 ATP 以驱动自身向微管负极（-极）运动，最终在负极解聚动粒微管 （kinetochore microtubule）[4] [5]。 迄今为止，许多 Kinesin 家族蛋白都被证实能够降低微管 35 40 的稳定性，而这类能够使微管末端去稳定的 Kinesin 统称为促解聚 kinesin（catastrophe kinesins）[6]。尽管促解聚类 kinesin 蛋白调控微管的机制被详尽研究，该类蛋白如何受到调 控却鲜见报道。Nucleophosmin (亦称为 B23)是一个可在细胞核与细胞质间自由穿梭的多功 能的磷酸化蛋白[7] [8]。B23 能够促进细胞增殖与转化，而 B23 的突变发生于诸多不同癌症中， 如急性粒细胞白血病[9] [10] [11]。该蛋白在细胞核内的功能被广泛报道，但其在细胞质中的功 能却不甚明朗。现有的研究显示 B23 在细胞有丝分裂中参与中心体复制，这暗示了 B23 蛋