维管特异性表达大豆类受体蛋白激酶GmSARK转基因拟南芥的获得和初步表型分析.docVIP

  维管特异性表达大豆类受体蛋白激酶 GmSARK 转基因拟南芥的获得和初步表型 分析# 5 10 15 20 25 30 35 40 王霞，刘栋，常大松，金凤，王丹，王宁宁** （南开大学生命科学学院植物生物学与生态学系，天津 300071） 摘要：植物 LRR 型类受体蛋白激酶（receptor-like protein kianse，RLK）广泛参与了植 物生长、发育以及环境刺激/应答反应等多种信号传递的过程，在植物生命活动中发挥着重 要 作 用 。 实 验 室 前 期 研 究 发 现 ， 大 豆 (Glycine max)LRR 型 类 受 体 蛋 白 激 酶 基 因 GmSARK(Glycine max senescence-associated receptor-like kinase)可能参与了大豆叶片 衰老的调控过程。本文报告了由维管特异性启动子 VS（Vascular-specific promoter）驱 动大豆类受体蛋白激酶 GmSARK 表达的双元表达载体的构建以及对野生型拟南芥的转化，并 对转基因拟南芥进行了初步分析。实验结果表明，转基因拟南芥虽然能完成正常的生活史， 但其生长缓慢，植株矮小，发育受到了明显抑制。 关键词：拟南芥；GmSARK；维管特异性启动子；衰老 中图分类号：Q943.2 Preliminary Analysis of Transgenic Arabidopsis Expressing Soybean Receptor-like Kinase GmSARK in Vascular Wang Xia, Liu Dong, Chang Dasong, Jin Feng, Wang Dan, Wang Ningning (Department of Plant Biology and Ecology, Nankai University, TianJin 300071) Abstract: Receptor-like protein kinases (RLKs) have been found to be involved in many developmental and environmental signal transduction pathways in higher plants. Our previous study suggested a role for a soybean LRR-RLK, GmSARK, in regulating leaf senescence. In this study, VS::GmSARK fusion gene was constructed and introduced into Arabidopsis by Agrobacterium-mediated floral dipping. Preliminary phenotypic analysis revealed that transgenic lines growth was dramatically inhibited with a normal life cycle. Keywords: Arabidopsis thaliana; GmSARK; Vascular-specific expression promoter; senescence 0 引言 衰老是植物个体发育过程中的最后阶段，受到遗传程序的严格调控[1]。目前对于植物衰 老程序的启动、传递、衰老进程的控制以及内外部调控因子之间的相互作用机制还不是很清 楚。 植物类受体蛋白激酶是一类包含胞外受体域、单次跨膜域和胞内激酶域的蛋白分子。它 们通过受体域与胞外信号分子的特异结合来激活胞内激酶域的自磷酸化和互磷酸化活性，完 成跨膜传递信号的功能[2]。 实验室在前期工作中，从衰老的大豆叶片中克隆了一个受衰老上调的 LRR 型类受体蛋 白激酶基因 GmSARK，利用 RNA 干扰技术敲除该基因的表达可明显延缓转基因大豆叶片的 衰老；而 CaMV35S 启动子驱动该基因过表达则造成转基因植株早衰和死亡， 暗示 GmSARK 可能作为衰老信号转导的重要组分直接参与了大豆叶片衰老的调控过程[3]。利用 GUS 组织 基金项目：教育部博士点基金 (编号: 200800550017) 作者简介：王霞，（1988-），女，硕士研究生，主要研究方向：植物生理与分子生物学。 通信联系人：王宁宁，教授，博士生导师，主要研究方向：植物生理与分子生物学。 E-mail: wangnn@nankai.edu.cn -1-   化学染色方法对 GmSARK 基因启动子的表达调控模式进行分析，发现该基因在维管系统具 有高表达[4]。为了