中药药理学专业毕业论文--黄连解毒汤所含黄酮成分对K562ADM细胞多药耐药相关基因表达的影响.docVIP

目 录 中文摘要 3 英文摘要 4 1.文献综述 5 1.1　MDR的实验研究 5 1.1.1　P-gp结构及生物学特征 5 1.1.2　mdr及mdr的分子遗传学 5 1.1.3　mdr-1的表达水平 5 1.2　MDR的临床研究 6 1.2.1　检测mdr-1RNA水平 6 1.2.2　MDR的逆转 6 1.2.3　利用mdr对肿瘤进行基因治疗 7 1.3 中药对抑制MDR前景展望 7 2.实验部分 9 2.1实验材料 9 2.1.1细胞系和培养基 9 2.1.2试剂 9 2.1.3仪器 9 2.2实验方法 9 2.2.1细胞培养 10 2.2.2药物处理 10 2.2.3 MTT 比色法测细胞增殖抑制 10 2.2.4半定量RT-PCR检测mdr-1、TopoⅡ基因mRNA表达 10 2.2.5统计学处理方法 11 3.实验结果 11 3.1ADM对K562细胞及K562/ADM细胞增殖抑制作用的影响 11 3.2 黄芩苷对K562/ADM细胞增殖抑制的影响 11 3.3京尼平苷对K562/ADM细胞增殖抑制的影响 12 3.4黄芩苷、京尼平苷作用后K562/ADM细胞中mdr-1、TopoⅡ及Caspase-3基因表达的变化 12 4.讨论 15 参考文献 17 致谢 19 摘 要 目的: 研究黄连解毒汤中黄酮成分对人类红白血病耐药细胞( K562/ADM 细胞) 的增殖抑制作用及相关因子表达的影响，并对其作用机制进行初步的探讨。 方法: 采用MTT 法检测黄连解毒汤中黄酮成分对细胞增殖抑制的影响。半定量RT-PCR 法检测mdr-1，TopoⅡ及Caspase-3基因的表达。 结果: 黄芩苷、京尼平苷对增值抑制作用明显且呈一定剂量依赖性。PCR结果显示黄芩苷、京尼平苷均可以通过降低mdr-1、TopoⅡ的表达，升高Caspase-3基因的表达，发挥逆转白血病细胞MDR的作用。 结论:黄连解毒汤中黄芩苷、京尼平苷为其干预与逆转肿瘤多药耐药的有效成分。其作用机制与改变mdr-1，TopoⅡ及Caspase-3基因的表达有关。 关键词：黄芩苷 京尼平苷 K562/ADM 细胞 多药耐药 Abstract Objective To investigate the reversal effect of the flavonoids ingredients extract from Huanglian Jiedu Decoction on proliferation inhibition of MDR of myelo genous leukemia K562/ ADM cells and on expression of K562/ADM cell’s multidrug resistance related gene, discuss the possible correlative mechanism. Methods The inhibitory rates of these cells were measured by MTT assay and define the effective chemical constituents. The mdr-1，TopoⅡand Caspase-3 were measured with RT-PCR. Results Baicaln、Geniposide could inhibit the growth of K562/ADM cell ,the relation of dosage-effct. Baicaln、Geniposide can decrease expression of mdr-1 and TopoⅡ,at the same time it can increase expression of and Caspase-3. Conclusion defined Baicaln、Geniposide is effective chemical consituents at work，Its mechanism may be related to down- regulating of The mdr-1，TopoⅡand Caspase-3 expresion. Key words: flavonoids ingredients K562/ ADMcells MDR  1.文献综述 肿瘤细胞的多药耐药(MDR)是肿瘤化疗有效率偏低的主要原因之一。在MDR中多药耐药基因(mdr)和由此编码的膜糖蛋白P(P-gp),近年来研究有较大的进展,并且部分研究已由实验转入临床,本文就MDR实验和临床两方面研究作简要概述。在临床