微生物营养与培养.ppt

第四章 微生物的营养与培养 第一节 微生物的六种营养要素 第二节 微生物的营养类型 第三节 培养基 第四节 微生物的生长与培养 第五节 影响微生物生长的主要因素 第六节 有害微生物的控制 营养(或营养作用,nutrition):是指生物体从外部环境摄取其生命活动所必需的能量和物质,以满足其生长和繁殖需要的一种生理功能。 营养物（或营养，nutrient）:指具有营养功能的物质。 1. 划线法 获得纯培养的方法 2. 平板涂抹法 4. 单细胞分离法 5. 利用选择培养基分离 3. 稀释平皿法 （二）同步培养（synchronous culture ） 使微生物群体中的所有细胞尽可能都处于同样生长和分裂周期中的培养称为同步培养。这种通过同步培养而使细胞群体处于分裂步调一致的状态称为同步生长。 同 步 生 长 曲 线 （三）分批培养 (batch culture or closed culture) 单细胞微生物在液体培养基中的生长规律 特点： ①生长速率常数等于零（生长速率常数R是指每小时的分裂代数）； ②细胞形态变大或增长； ③细胞内RNA等的含量增高； ④合成代谢活跃； ⑤对外界理化因子反映敏感。 影响因素： ①菌龄； ②接种量； ③培养基成分等。 1．延滞期（lag phase） 特点： ①R最大，因而细胞每分裂一次所需的时间G（generation time---世代时间，简称为“代时”）最短； ②细胞进行平衡生长，菌体内各种成分最为均匀； ③酶系活跃代谢旺盛。 影响因素： ①菌种； ②营养成分； ③营养物浓度。 2．指数期（exponential phase） 特点： ①R等于零，菌体产量达到最高； ②细胞开始储存糖原、异染颗粒和脂肪等储藏物； ③多数芽孢杆菌在这时开始形成芽孢； ④有的微生物此时开始合成抗生素等次生代谢物。 稳定期到来的原因： ①营养物尤其是生长限制因子的耗尽； ②营养物的比例失调，如C/N比例不合适等； ③酸、醇毒素或H2O2等有害代谢产物的累积； ④pH、氧化还原势等物化条件越来越不适宜等。 3．稳定期（stationary phase） 特点：R为负值，细胞形态多样如膨大、不规则的退化形态，有的微生物因蛋白水解酶活力的增强就发生自溶（autolysis）；有的微生物产生或释放对人类有用的抗生素等次生代谢产物，芽孢杆菌中芽孢释放往往也发生在这一时期。 4．衰亡期（death phase或decline phase） （四）微生物的连续培养（continuous culture） 当微生物以单批培养的方式培养到指数期的后期时，一方面以一定速度连续流进新鲜培养基，并立即搅拌均匀，另一方面，利用溢流的方式，以同样的流速不断流出培养物。这样，培养物就达到动态平衡，其中的微生物可长期保持在指数期的平衡生长状态和稳定的生长速率上。 （五）固定化培养 将微生物细胞包埋在特定的载体内，然后把它置于发酵液中，微生物在载体内的空隙中生长繁殖，并对基质进行发酵形成发酵产物。常用的载体有琼脂、明胶、海藻酸钠海藻酸钙等。 三、常见微生物培养方法 斜面试管培养 琼脂平板培养 试管液体培养 三角瓶液体浅层培养 摇瓶培养 第五节 影响微生物生长的主要因素 影响微生物生长的因素很多，除了营养条件外，还有许多理化条件，其中最主要的有温度、pH、和氧气。 (一) 温度 微 生 的生长温度 最低生长温度：一般为 -5 ～ -10℃，极端为 -30℃ 最适生长温度 嗜冷菌： 20℃ 中温菌：20 ～ 45℃ 室温菌（25℃） 体温菌（37℃） 嗜热菌： 45℃ 最高生长温度：一般 80 ～ 95℃，极端 105 ～ 300℃ 最适生长温度：某菌分裂代时最短或生长速率最高时的培养温度。 微生物 好氧菌 厌氧菌 专性好氧菌：在正常大气压下进行好氧呼吸产能。 兼性厌氧菌：以呼吸为主，兼营发酵产能；以呼吸为主， 兼营厌氧呼吸产能。 微 好 氧 菌：只能在较低的大气压下生活。 专性厌氧菌：只能生长在无氧或基本无氧条件下，氧对其有毒害 耐氧菌：只能以发酵产能，但分子氧无毒害。 (二)????氧气 * * 第一节 微生物的六种营养要素 微生物和动物、植物营养要素的比较 营养要素 动物 （异养） 微生物 绿色植物 （自养） 异养 自养 碳 源 糖类、脂肪 糖、醇、有机酸等