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②图中DNA分子复制是边解旋边双向复制的。 ③图中DNA分子在复制速率相同的前提下,复制开始的时间最右边最早。 ④真核生物的这种复制方式提高了复制速率。 ⑤从箭头看子链的合成方向与母链相反,且右上与左下段连续复制,而左上与右下段复制不连续,最终不连续的片段需要DNA连接酶连接成完整子链。 1.研究DNA复制的常用方法同位素标记法和离心法,常标记3H、15N、32P,通过离心在试管中形成不同位置。 2.DNA复制的条件 考点剖析 解旋酶、DNA聚合酶 ATP 四种游离的脱氧核苷酸 解旋后的两条链 酶 能量 原料 模板 注意 ①影响细胞呼吸(ATP供给)的所有因素都可能影响DNA复制。 ②体外也可进行,即PCR扩增技术,除满足上述条件外,还应注意温度、pH 的控制及引物的加入。 3.DNA分子复制中相关计算 DNA的复制为半保留复制,一个DNA分子复制n次,则: ⑴DNA分子数:①子代DNA分子数=2n个;②含有亲代DNA链的子代DNA分子数=2个;③不含亲代链的子代DNA分子数=(2n-2)个。 ⑵脱氧核苷酸链数:①子代DNA分子中脱氧核苷酸链数=2n+1条;②亲代脱氧核苷酸链数=2条;③新合成的脱氧核苷酸链数=(2n+1-2)条。 3.用32P标记一个T2噬菌体的双链DNA分子,它侵染一个含31P的细菌后释放出了200个后代,则后代中含32P的噬菌体最多占总数的 ( ) A.2% B.1% C.0.5% D.50% 对位训练 提示 亲代DNA的两条模板链不管复制多少次,始终分布在2个DNA分子中。 答案 B 解析 一个噬菌体中只有一个DNA分子,当它侵染含31P的细菌后就以被32P标记的DNA为模板进行复制,不过利用的酶、原料、ATP等均是由细菌提供的。DNA分子的复制方式为半保留复制,故在最终形成的200个噬菌体的DNA中,最多只有2个DNA分子含32P,即在200个噬菌体中含32P的噬菌体最多占1%。 关于DNA复制方式的探究,充分体现了假说—演绎法,即在克里克假说的基础上,通过演绎推理,最终通过实验得以验证。 1.实验材料:大肠杆菌。 2.实验方法:放射性同位素标记技术和离心技术。 3.实验假设:DNA以半保留的方式复制。 4.实验过程(如图) 方法体验 DNA半保留复制的原理和相关计算 ⑴大肠杆菌在含15N标记的NH4Cl培养基中繁殖几代,使DNA双链充分标记15N。 ⑵将含15N的大肠杆菌转移到14N标记的普通培养基中培养。 ⑶在不同时刻收集大肠杆菌并提取DNA(间隔的时间为大肠杆菌繁殖一代所需时间)。 ⑷将提取的DNA进行离心,记录离心后试管中DNA位置。 5.实验预期:离心后应出现3条DNA带。(如上图) ⑴重带(密度最大):15N标记的亲代双链DNA(15N/15N)。 ⑵中带(密度居中):一条链为15N,另一条链为14N标记的子代双链DNA(15N/14N)。 ⑶轻带(密度最小):两条链都为14N标记的子代双链DNA(14N/14N)。 6.实验结果:与预期的相符。 提醒 DNA复制为半保留复制,所以亲代的2条15N链不会消失,最终分布在2个DNA分子中,即不管DNA复制多少次,含亲代15N链的DNA只有2个,15N链始终为2条。 典例 (2010·北京理综,30)科学家以大肠杆菌为实验对象,运用同位素示踪技术及密度梯度离心方法进行了DNA复制方式的探索实验,实验内容及结果见下表。 1/2轻带(14N/14N) 1/2中带(15N/14N) 仅为中带(15N/14N) 仅为重带(15N/15N) 仅为轻带(14N/14N) 离心结果 提取DNA并离心 操作 B的子Ⅱ代 B的子Ⅰ代 B A 培养产物 两代 一代 多代 多代 繁殖代数 14NH4Cl 14NH4Cl 15NH4Cl 14NH4Cl 培养液中 唯一氮源 4组 3组 2组 1组 组别 请分析并回答: ⑴要得到DNA中的N全部被放射性标记的大肠杆菌B,必须经过_代培养,且培养液中的_____是唯一氮源。 ⑵综合分析本实验的DNA离心结果,第_组结果对得到结论起到了关键作用,但需把它与第_组和第_组的结果进行比较,才能说明DNA分子的复制方式是_____。 ⑶分析讨论: ①若子Ⅰ代DNA的离心结果为“轻”和“重”两条密度带,则“重带”DNA来自于_,据此可判断DNA分子的复制方式不是____复制。 ②
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