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【答案】(1)不同的菌株生活在不同的环境中,根据目的菌株对生存环境的要求,到相应的环境中去寻找 (2)葡萄糖 明显多于选择培养基上的菌落数 (3)稀释涂布平板 平板划线法难以根据稀释体积计算每克样品中的细菌数 1.消毒和灭菌的区别 用酒精消毒时,70%的酒精杀菌效果最好,原因是:浓度过高,使菌体表面蛋白质凝固成一层保护膜,乙醇分子不能渗入其中;浓度过低,杀菌力减弱。 2.培养基的制作是否合格 如果未接种的培养基在恒温箱中保温1~2天后无菌落生长,说明培养基的制备是成功的,否则需要重新制备。 3.平板冷凝后,为什么要将平板倒置? 平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表面的湿度也比较高,将平板倒置,既可以使培养基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。 4.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环?在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗?为什么? 操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养基;每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后,接种环上残留的菌种,使下一次划线时,接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端,从而通过划线次数的增加,使每次划线时菌种的数目逐渐减少,以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环,能及时杀死接种环上残留的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者。 1.(2009·安徽)下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述,其中错误的是( ) A.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基,经高温、高压灭菌后倒平板 B.取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL,分别涂布于各组平板上 C.将实验组和对照组平板倒置,37 ℃恒温培养24~48小时 D.确定对照组无菌后,选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数 D 【解析】本题考查的是选修1专题2“微生物的培养与应用”的有关知识。确定对照组无菌后,选择菌落数在30~300的平板进行计数,求其平均值,再通过计算得出土壤中细菌总数 2.(2011·新课标)有些细菌可分解原油,从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题: (1)在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以 为唯一碳源的固体培养基上。从功能上讲,该培养基属于 培养基。 (2)纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有两种,即 和 。 原 油 选择 平板划线法 稀释涂布平板法 (3)为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈大说明该菌株的降解能力 。 (4)通常情况下,在微生物培养过程中,实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、 和 。无菌技术要求实验操作应在酒精灯 附近进行,以避免周围环境中微生物的污染。 强 干热灭菌 高压蒸汽灭菌 火焰 【解析】(1)题中想筛选分解原油的菌株,应该以原油为唯一的碳源。培养基分为选择培养基和鉴别培养基,本题是筛选菌株,属于选择培养基。(2)接种方法分为平板划线法和稀释涂布平板法。(3)菌株的分解能力越强,分解的原油越多,则分解圈越大。(4)微生物实验要求在无菌环境中操作,灭菌方法包括灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌。 3.(2011·山东)研究发现柚皮精油和乳酸菌素(小分子蛋白质)均有抑菌作用,两者的提取及应用如图所示。 (1)柚皮易焦糊,宜采用 法提取柚皮精油,该过程得到的糊状液体可通过 除去其中的固体杂质。 (2)筛选乳酸菌A时可选用平板划线法或 接种。对新配制的培养基灭菌时所用的设备是 。实验前需对超净工作台进行 处理。 压榨 过滤 稀释涂布平板 法(或稀释混合平板法) 高压蒸汽灭菌锅 消毒 (3)培养基中的尿素可为乳酸菌A生长提供 。电泳法纯化乳酸菌素时,若分离带电荷相同的蛋白质,则其分子量越大,电泳速度 。 (4)抑菌实验时,在长满致病菌的平板上,会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的 来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。 氮源 越慢 直径(或 大小) 4.下列是与微生物培养有关的问题,请回答: 某细菌固体培养基的组成成分是KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、葡萄糖、
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