2012版高中生物全程复习方略配套课件：选修1.6 蛋白质和DNA技术（中图版）.pptVIP

(2)PCR反应中，如果以引物为标记，共有几种DNA分子产生？ 提示：共有3种。 一、选择题 1.蛋白质的分离与纯化技术是蛋白质研究的重要技术。下列有关叙述不正确的是( ) A.根据蛋白质分子不能透过半透膜的特性，可将样品中各种不同的蛋白质分离 B.根据蛋白质所带电荷性质的差异及分子大小等，可通过电泳分离蛋白质 C.在分离与纯化蛋白质之前，必须采用适当的方法使蛋白质呈溶解状态释放出来 D.根据蛋白质的分子大小、密度不同，可通过离心法分离蛋白质 【解析】选A。蛋白质分子本身太大不能透过半透膜，所以只能局限于半透膜一侧，而不能将各种不同的蛋白质分开。蛋白质存在于生物体的组织细胞中，要研究某种蛋白质的结构、性质、功能，需将蛋白质呈溶解状态释放出来。目前常用的纯化蛋白质的方法有透析法、离心沉降法和电泳法等。 2.PCR(聚合酶链式反应)技术是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术，如图表示合成过程。下列说法错误的是( ) A.A过程高温使DNA变性解旋，该过程不需要解旋酶的作用 B.C过程要用到的酶在高温下失活，因此在PCR扩增时需要再添加 C.如果把模板DNA的两条链用15N标记，游离的脱氧核苷酸不做标记，控制“95℃～55℃～72℃”温度循环3次，则在形成的子代DNA中含有15N标记的DNA占25% D.PCR中由碱基错配引起的变异属于基因突变 【解析】选B。高温所起的作用类似于解旋酶，使双链DNA变为单链。C过程为PCR技术的延伸阶段，当系统温度上升至72℃左右时，溶液中的四种脱氧核苷酸在DNA聚合酶的作用下合成新的DNA链。Taq DNA聚合酶是耐热的，高温下不变性，所以一次性加入即可。PCR技术遵循半保留复制的特点。经过三次循环，共产生23个DNA分子，其中有2个DNA分子含有15N标记。基因中的碱基对改变属于基因突变。 3.(2011·延安模拟)在PCR扩增前，需要将下列哪些物质加入微量离心管中( ) ①模板DNA ②模板RNA ③DNA解旋酶 ④耐高温的DNA聚合酶 ⑤引物 ⑥PCR缓冲液 ⑦脱氧核苷酸贮备液 ⑧核苷酸贮备液 A．①④⑤⑥⑦ B．①③④⑤⑥⑧ C．②③④⑤⑥⑦ D．①④⑥⑦⑧ 【解析】选A。进行PCR扩增前，将PCR缓冲液、DNA模板、一对引物、四种脱氧核苷酸、DNA聚合酶、Mg2+等成分加到一种特制的微量离心管中。 4.“X基因”是DNA分子上一个有遗传效应的片段，若要用PCR技术特异性地拷贝“X基因”，需要在PCR反应中加入两种引物，两种引物及其与模板链的结合位置如图1所示。经过4轮循环后产物中有五种不同的DNA分子，如图2所示，其中第⑤种DNA分子有几个( ) A.2 B.4 C.6 D.8 【解析】选D。在PCR技术扩增时，由两种引物决定所扩增的片段的特定序列，上一次循环的产物为下一次循环的模板。第一次循环形成①和②，第二次循环形成①、②、③、④ 4分子DNA，以此类推4次循环后共形成16分子DNA，其中①、②各1分子，③、④各3分子，⑤共8分子。 5.(2011·德州模拟)如图表示对某蛋白质溶液进行SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳的结果(类似于纸层析法分离色素)，下列相关叙述不正确的是( ) A.蛋白质上某些基团解离后可使蛋白质带电，电场中带电的蛋白质分子(或多肽)会向着与其所带电荷相反的电极移动 B.在SDS-聚丙烯酰胺凝胶中，蛋白质的迁移速度完全取决于其所带净电荷多少 C.在SDS-聚丙烯酰胺凝胶中，蛋白质的迁移速度基本取决于其相对分子质量大小 D.电泳结果表明溶液中蛋白质可能有两种，但也可能只有一种 【解析】选B。本题考查了电泳的原理与应用。蛋白质的氨基与羧基可发生解离，使其带正电或负电，在电场中发生迁移。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳所加的SDS可完全掩盖蛋白质本身所带的电荷，其移动速度与本身所带的电荷无关，只由其分子大小决定。此电泳会使蛋白质水解成肽链，结果可能只有一种蛋白质(有两种肽链)，也可能是两种蛋白质。 二、非选择题 6.(1)商品化植酸酶主要来自微生物。在产酶菌株筛选过程中，常在基本培养基中添加不溶于水的植酸钙制成固体平板，植酸钙被植酸酶分解后可在平板上产生______，可根据其大小选择目的菌株，所得菌株需要进一步测定植酸酶活性。活性测定可以植酸钠作为底物，活性可用一定条件下单位时间________________表示。 (2)利用上述所得菌株制备植酸酶的流程如图： Ⅰ中的主要成分为______；Ⅱ中包含植酸酶等多种蛋白质。请写出一种纯化得到植酸酶的方法及其依据。 (3)为建设基因工程菌，可用PCR等技术从上述菌株中克隆植酸酶基因。PCR