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最新考纲 1.动物胚胎发育的基本过程与胚胎工程的理论基础Ⅰ 2.胚胎干细胞的移植Ⅰ 3.胚胎工程的应用Ⅱ 考纲解读 1.胚胎发育的基本过程与胚胎移植的时机 2.胚胎干细胞的特点及其实践应用 3.胚胎移植的生理基础及基本程序 看一看:体外受精常用的采卵方法有哪些? 答案:①用促性腺激素处理,从输卵管冲取卵子。②从活体动物卵巢吸取卵母细胞。 思一思:为什么说关于动物的体内受精和胚胎发育的研究,会为胚胎工程提供理论基础?请结合本节内容举例说明。 答案:胚胎工程的许多技术都是在了解哺乳动物自然条件下受精和早期胚胎发育的基础上实现的。本节涉及的哺乳动物体内受精和胚胎发育都是在自然条件下的特点和规律,人们正是在认识了这些自然规律的基础上,在体外进行有效的模拟,才使卵母细胞能在体外成熟,精子能在体外完成获能,获能精子和成熟卵母细胞能在试管内完成受精,体外受精卵能在人工培养条件下继续发育等,这些都有赖于体内自然条件下的基础研究成果。 议一议:试管牛的工厂化流程如何? 答案:“试管牛”工厂化生产的技术流程图(如右图): 看一看:如何进行牛胚胎的分割? 答案:用分割针或分割刀片将胚胎切开,吸出其中的半个胚胎,注入预先准备好的空透明带中,或直接将裸半胚移植给受体。 胚胎干细胞克隆 1.要注意区分受精的标志和受精过程结束的标志。受精的标志是卵黄膜和透明带的间隙可以观察到两个极体,受精过程结束的标志是雌、雄原核融合成合子。 2.受精过程中有三大反应(作用):顶体反应、透明带反应、卵黄膜封闭作用。三大反应(作用)的作用不同:顶体反应主要是形成精子穿越放射冠的通路;透明带反应是防止多精子入卵受精的第一道屏障;卵黄膜 封闭作用则是防止多精子入卵受精的第二道屏障。 3.动物排出卵子的成熟程度不同,有的可能是次级卵母细胞,如猪、羊等;有的可能是初级卵母细胞,如马、犬等,但它们都要在输卵管内进一步成熟,当达到减数第二次分裂的中期时,才具有与精子受精的能力。 4.胚胎早期培养过程中有两次用到了显微镜进行检查:①在进行卵母细胞成熟培养前,要抽取卵母细胞在显微镜下检查并挑选;②胚胎培养前要用显微镜检查受精卵。 原因解释: 精液由精子和精清(精浆)两部分组成。精清中含有一种能抑制精子获能的物质,因此,在一般情况下,精液中的精子无法获能。只有当交配后精液进入雌性动物的生殖道时,由生殖道分泌产生一种物质解除对精子获能的抑制,才能引起精子获能。精子在雌性动物生殖道内获能的部位因种类而异,但主要是子宫和输卵管。 ②卵子的准备:在输卵管中发育到减数第二次分裂的中期,才具有与精子受精的能力。 (3)受精阶段——四步曲 第一步:精子穿越放射冠和透明带。顶体反应使顶体内的酶释放出来并溶解放射冠内的卵丘细胞之间的物质,透明带反应是防止多精入卵受精的第一道屏障。 第二步:精子进入卵黄膜。卵黄膜封闭作用是防止多精入卵受精的第二道屏障。 第三步:原核形成。雄原核形成和雌原核形成。 第四步:合子形成。雌雄原核融合形成合子(受精卵)。 2.胚胎发育过程 二、体外受精与胚胎的早期培养 1.体外受精的原理:人工模拟体内环境(包括营养、温度、pH等),使初级卵母细胞成熟和精子获能,最终完成受精和胚胎保存。 2.体外受精主要操作步骤 (1)卵母细胞的采集 方法一:对小型动物一般采用促性腺激素处理,排卵后直接从输卵管中冲取卵子,直接与获能的精子在体外受精。 方法二:对大型动物一般采用从活体的卵巢中吸取卵母细胞,经体外人工培养成熟后与获能的精子在体外受精。 (2)精子的采集和获能 采集方法:假阴道法、手握法和电刺激法等。 获能方法:培养法和化学诱导法。 (3)受精:获能精子和成熟卵子在共同培养一段时间后便可受精。 3.胚胎的早期培养 (1)培养的目的:检测受精状况和受精卵的发育能力。 (2)培养液的成分:水、无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及动物血清等。 (3)胚胎去向:冷冻保存、移植到受体动物子宫内培养。 三、胚胎移植及胚胎分割移植 1.概念 是指将雌性动物的早期胚胎,或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎,移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内,使之继续发育为新个体的技术。 2.胚胎移植的实质 胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移,而胚胎本身的遗传物质并不发生改变,因此各种性状能保持其原来的优良特性。 3.胚胎移植成功的保障(生理学基础) 第一,供、受体生殖器官的生理变化是相同的。 第二,哺乳动物的早期胚胎形成后,在一定时间内不会与母体子宫建立组织上的联系,而是处于游离状态,这就为胚胎的收集提供了可能。 第三,受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应,这为胚胎在受体内的存活提供了可能。 第四,供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系,但
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