流式细胞术在免疫学上的应用及其发展前景.pdfVIP

第40 卷第6 期 东 北 农 业 大 学 学 报 40(6): 137~140 2009 年6 月 Journal of Northeast Agricultural University June 2009 文章编号 1005－9369 （2009）06－0137－04 流式细胞术在免疫学上的应用及其发展前景 1 2 1 1* 邓喜林 ，林跃智，李 蕊 ，刘皙洁 （1． 东北农业大学动物医学学院，哈尔滨 150030；2． 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所，哈尔滨 150001） 摘 要：近些年来流式细胞术（FCM）发展迅速，除了用于科学研究以外，FCM 己广泛用于基础医学及临床医 学的相关领域之中。文章阐述了FCM 组成及作用机理并与其他免疫检测方法进行比较，着重介绍了FCM 在免疫 学中的应用，并展示了FCM 在免疫学上应用的广阔前景。 关键词：FCM ；免疫学；进展 中图分类号：Q352；Q813 文献标识码：A 流式细胞术（Flow Cytometry ，FCM）是对被荧 要根据被激发物质的激发光谱而定。③ 光电管和 光色素染色的单细胞或微粒，在激光照射高速流 检测系统：经荧光染色的细胞经合适的光激发后所 动状态下，对其进行快速、精确地定性或定量检 产生的荧光是通过光电转换器转变成电信号而进行 测的一种现代细胞分析和分选技术，既可测量细 测量的，光电倍增管（Photo Multiplier Tube ，PMT） 胞大小、 内部结构，又可检测细胞表面抗原、抗 最为常用。④ 计算机和分析系统：经放大后的电 体、细胞内部DNA、RNA 含量等，是对细胞等生 信号被送往计算机分析器，多道的道数是和电信号 [2] 物粒子的理化及生物特性进行分析的方法。流式 的脉冲高度相对应的 。 细胞仪是近代细胞生物学、分子生物学、分子免 1.2 流式细胞仪检测原理 疫学和单克隆技术、激光技术、 电子计算机术等 将待测样品制成单细胞悬液，当单细胞悬液进 学科高度发展的结晶。在血液学、肿瘤学等学科 入测量区时会产生层流和湍流，在此采用了鞘流原 [1] -1 尤其是在免疫学方面得到广泛应用 。 理，样品在压力的作用下以恒定的速度（5～10 m·s ） 进入流动室，同时鞘液（Sheath Fluid）在高压下自 1 流式细胞仪简介 鞘液管进入流动室，样品就在鞘液的包被下排列成 1.1 流式细胞仪的组成部分 有序的单列细胞，快速从喷嘴喷出，形成细胞液 流式细胞仪的基本结构主要由四部分组成。 柱，恒定地处于同轴流动中心位置，其精度可稳定 [3] ① 流动室和液流系统：该系统由样品管、鞘液管 在几微米之内 。在喷嘴下方，细胞液柱与入射的 和喷嘴等组成，常用光学玻璃、石英等透明、稳 激光束垂直相交，该处是液流直径最小处，通常为 定的材料制作而成。其特点是设计和制作均很精 10～20 μm ，做到了单个细胞进入检测区。染色细 细，是液流系统的心脏。② 激光源和光