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实验专题 一、考纲的实验考点盘点 内容 说明 （1）（2）生物组织中还原糖、脂肪蛋白质（3）观察 （4）观察叶绿体 （5）观察植物细胞的质壁分离复原（6）探索酶活性的 （7）叶绿体中色素的提取和分离（8）（9）观察细胞的有丝分裂（10） （11）（12） （13）调查的遗传病 （14） （15）（16） 二、实验指导 ▲观察DNA、RNA在细胞中的分布 一、实验原理 甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同，甲基绿使DNA呈现绿色，吡罗红使RNA呈现红色。利用甲基绿和吡罗红混合染色剂将细胞染色，可以显示DNA和RNA在细胞中的分布。盐酸能够改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色体中的DNA与蛋白质分离，有利于DNA和染色剂结合。 二、目的要求 初步掌握观察DNA和RNA在细胞中分布的方法。 三、材料用具 1．实验材料：人的口腔上皮细胞 2．仪器和试剂：略 四、实验的方法、步骤 1.取口腔上皮细胞 （1）在洁净的载玻片上，滴一滴质量分数为0.9%的NaCl溶液。 （2）用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁上轻轻地刮几下，把牙签上附有碎屑的一端，放在载玻片的液滴中涂抹几下。 （3）点燃酒精灯，将涂有口腔上皮细胞的载玻片烘干。 2.水解 （1）在小烧杯中加入30 mL质量分数为8%的盐酸，将烘干的载玻片放入小烧杯中。 （2）在大烧杯中加入30 ℃温水。 （3）将盛有盐酸和载玻片的小烧杯放在大烧杯中保温5 min。 3.冲洗涂片用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10 s。 4.染色 （1）用吸水纸吸去载玻片上的水分。 （2）将吡罗红甲基绿染色剂滴2滴在载玻片上，染色5 min。 （3）吸去多余染色剂，盖上盖玻片。 5.观察 ▲检测生物组织中还原糖、脂肪蛋白质 ，苏丹Ⅲ或苏丹IV染液，双缩脲试剂（A液：质量浓度为0．1 g/mL的NaOH溶液，B液：质量浓度为0．01 g/mL的CuSO4溶液配制而成），体积分数为50%的酒精溶液，蒸馏水。 四、实验的方法、步骤 1．可溶性还原糖的鉴定 制备生物组织样液取样注入试剂50－65℃水浴加热和观察 2．脂肪的鉴定 制备生物组织实验材料染色 去浮色 制作临时装片→放在显微镜下观察（先低倍镜后高倍镜） 3．蛋白质的鉴定 制备生物组织样液 注入组织样液 注入试剂A液， 注入试剂B 观察颜色变化 五、实验成功的关键及注意事项 1．实验成功的关键在于实验材料的选择 （1）可溶性还原糖的鉴定实验中，最理想的实验材料是含糖量较高的生物组织(或器官)，而且组织的颜色较浅，或近于白色的。经试验比较，颜色反应的明显程度依次为苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜。 （2）脂肪的鉴定实验中，实验材料最好选用富含脂肪的种子，且徒手切片要成功。 （3）蛋白质的鉴定实验，最好选用富含蛋白质的生物组织，植物材料常用的是大豆，动物材料常用的是鸡蛋。 2．注意事项 （1）斐林试剂很不稳定，故应将组成斐林试剂的甲液(0.1 g/mL的NaOH溶液)和乙液(0．05 g/mL的CuSO４溶液)分别配制、储存，使用时再临时配制，将甲乙两液在另一支试管中等量混匀，立即使用。 （2）双缩脲试剂的使用，应先加试剂A 1mL(0.1 g/mL的NaOH溶液)，造成碱性的反应环境，再加试剂B4滴(0.01 g/mL的CuSO４溶液)。 ▲用显微镜观察观察叶绿体步骤 操作方法 目的与作用 （1）取材 ①新鲜的藓类的叶 ②菠菜叶下表皮略带一些叶肉 ①藓类叶为单层细胞②下表皮容易撕取,要略带些叶肉 （2）制片 注意叶片不能太干了，保持有水的状态 以免影响细胞活性 （3）观察 叶绿体呈椭圆形，可随细胞质的流动而流动。 （1）取材 漱口，口腔内侧壁上轻刮几下 ? （2）染色 将口腔细胞放在健那绿液滴上 ? （3）观察 盖上盖玻片，显微镜下观察，线粒体被染成蓝绿色 问题 1、为什么不用植物细胞来观察线粒体？ 植物线粒体相对较少，叶绿体颜色易掩盖线粒体被染成的蓝绿色。2、如果观察发现染色不足，如何补色？ 在盖玻片一侧滴加健那绿液，另一侧用吸水纸吸 ▲观察植物细胞的质壁分离复原▲探索酶活性的 二、实验原理 淀粉麦芽糖和葡萄糖砖红色沉淀 ↓I（碘液） ↓I（碘液） 紫蓝色复合物 不形成紫蓝色复合物 三、实验步骤 1．温度对酶活性的影响（注：适于用淀粉酶与淀粉，不宜用H2O2酶与H2O2溶液） 试管5 试管6 1 加可溶性淀粉溶液 2m