大鼠胚胎脑新皮质神经干细胞的体外分离培养方法研究.pdfVIP

39 6 Vol. 39 No. 6 第 卷 第 期 卫 生 研 究 674 2010 年 11 月 JOURNAL OF HYGIENE RESEARCH Nov. 2010 :1000-8020 (2010 )06-0674-05 · · 文章编号 论著 大鼠胚胎脑新皮质神经干细胞的体外分离培养方法研究 王霞1 韦霄 郑唯韡 张皓 陈涵一 田大军 蒋颂辉 屈卫东1 复旦大学公共卫生学院环境卫生学教研 ， 200032 室公共卫生安全教育部重点实验室 上海 : 。 14 SD 摘要 目的 建立大鼠胚胎脑新皮质神经干细胞的体外分离培养方法 方法 从孕 天 大鼠胚胎 ， 、 ， 。 脑分离新皮质 通过机械吹打改善细胞分散状态 优化无血清培养基条件 从而改进神经干细胞的培养方法 (nestin SOX2)、 利用神经干细胞标志蛋白 和 增殖和克隆成球能力以及多向分化能力测试三方面对神经干细 。 nestin ，SOX2 99% ， 胞进行鉴定 结果 以该法培养的神经干细胞 蛋白呈强阳性表达 阳性表达率达 以上 BrdU ， 3 10. 55 ，6 (33. 00 ± 4. 40 )% 。 掺入阳性 培养 天后细胞量为接种量的 倍 日克隆成球率为 经相应特异 (MAP2)、 (GFAP) 性标志蛋白检测证实神经干细胞经诱导分化后可形成神经元 星形胶质细胞 和少突胶质细 (O4)。 ， 。 胞 结论 获得的神经干细胞纯度和细胞产出率高 具有强自我更新和多向分化能力