第六讲实验动物的处死、解剖、脏器.pptVIP

第六讲实验动物的处死 当实验中途停止或结束时，实验者应站在实验动物的立场上以人道的原则去处置动物，原则上不给实验动物任何恐怖和痛苦，也就是要施行安乐死。 安乐死是指实验动物在没有痛苦感觉的情况下死去。实验动物安乐死方法的选择取决于动物的种类与研究的课题。 动物的处死原则是处死时间短、尽量减少实验动物死亡过程中的挣扎和人为损伤，避免处死方法不当而人为造成脏器及细胞形态改变。 实验动物的处死主要是指淘汰过度繁殖的动物；为了保护健康动物而处死患病的动物，因中断实验而淘汰的动物；实验结束后需处死后进一步检查的动物。 处死动物的方法依实验目的和动物不同而定，常用的方法如下: 机械暴力法 空气栓塞法 急性失血法 药物麻醉法及CO2吸入法 开放性气胸法 化学药物致死法 机械暴力法 击打法：适合于大、小鼠、家兔等，如手提起大小鼠尾用力摔击，使其头部碰地、鼠痉挛后立即死亡；用木锤用力锤其后脑部，损坏延脑，造成死亡;击打家兔和豚鼠头盖骨，使大脑中枢受破坏而动物死亡。此方法具有处死动物快，简单易行，效率高等优点，但可引起脑损伤、痉挛、鼻出血，颈部气管或肺内出血、个别内脏破裂等缺点，此处动物死亡前剧烈的挣扎和抽搐可造成人为的形态改变。 断髓法：大、小鼠最常用，右手抓住鼠尾用力向后拉，同时左手拇指与食指用力向下按住鼠头，将背髓与脑髓拉断，鼠便立即死亡;1kg以下的小兔或小品种的家兔，将右手除拇指以外的四指放在耳后，左手紧紧握住兔的后腿用右手拇指压住后头部，其余四指快速将颈推向上方，兔很快就会死亡，但应注意所用力量不能过猛，以免拉断胸主动脉，导致腔内大出血，从而人为地造成各内脏的贫血性改变。此方法简便，动物死亡快，但可引起肺、脾、肾等脏器充血和瘀血。 断头法：适用于大、小鼠及豚鼠等，用大剪刀在颈部将鼠头剪断，然后迅速将动物倒提放血、应避免血液流入气管，由于脑脊髓横断及大量失血，动物立即死亡。此法简单易行、动物挣扎少、死亡快、流血多、对内脏损伤少，但处死动物时血液可灌入气管及肺组织．影响肺重及组织学镜检，有时可损伤甲状腺。 破坏脑脊椎法：适用于青蛙及蟾蜍。将蛙用湿布包住，露出头部，左手执蛙，并用食指按压其头部前端，拇指按压背部，使头前俯，右手持金属探针由头前端沿中线向尾方刺触，触及凹陷处即枕骨大孔所在，将探针由凹陷处垂直刺入，刺破皮肤即入枕骨大孔，这时将探针尖端转向头方，向前探入颅腔，然后向各方搅动，以捣毁脑组织； 如探针确在颅腔内，实验者可觉出针在四面皆壁的腔内；脑组织捣毁后、将探针退出，再由枕骨大孔刺入，并转向尾方，与脊柱平行刺入椎管，以破坏脊髓，脑和脊髓是否被完全破坏，可检查动物四肢肌肉的紧张性是否完全消失。脑脊椎破坏后蛙将死亡。 操作过程中要防止毒腺分泌物射入实验者眼内，如被射入时，应立即用生理盐水冲洗眼睛。 空气栓塞法 适用于较大动物，向动物静脉内注入一定量的空气，使之发生栓塞而死。当空气注入静脉后，可在右心随着心脏的跳动使空气与血液相混致血液成泡沫状，随血液循环到全身，如进入肺动脉，可阻梗其分支，进入心脏冠状动脉，造成冠状动脉阻塞，发生严重的血液循环障碍，动物很快致死。 一般兔、猫等静脉内注入20～40ml空气即可致死,狗由前肢或后肢皮下静脉注入80～150ml空气，可很快致死。 急性失血法 大、小动物均可采用此法处死。大、小鼠、豚鼠和家兔等均可采用颈总动脉放血而致死；狗可按每公斤体重静脉注射硫喷妥钠20～30mg，动物即很快入睡，暴露股三角区，用锋利的刀在股三角区作一个约10cm的横切口，把股动、静脉全切断，立即喷出血液，用一块湿纱布不断擦去股动脉切口周围处的血液和血凝块，同时不断的用自来水冲洗流血，使股动脉切口处保持畅通，动物3～5分即可死亡。 采用此种方法，动物十分安静，对脏器无损伤，对活杀采集病理切片标本是一种较好的方法，但此法易造成动物内脏人为贫血，影响脏器重。 药物麻醉法及CO2吸入法 此种方法适用于大、小鼠和家兔等。将浸透乙醚或氯仿的棉花放入大口瓶或其它密闭的容器内，将大鼠或小鼠放入盖紧，数分钟后动物麻醉过度而死亡；也可给大、小鼠腹腔注射90mg/kg的戊巴比妥或给豚鼠和家兔腹腔、静脉或心内注射大 剂量的戊巴比妥而使动物发生死亡；也可将动物装笼后放入透明塑料袋内，封好，慢慢充入CO2，动物吸入后很快会死亡。 开放性气胸法 此法适合于大、小鼠和家兔等。将动物开胸，造成开放性气胸，这时胸膜腔的压力与大气压力相等，肺脏因受大气压缩发生肺萎陷，纵隔摆动，动物窒息而死。 化学药物致死法 此法适用于各种动物。静脉内注入一定量的氯化钾溶液，使动物心肌失去收缩能力，心脏急性扩张，致心脏弛缓性停跳而死亡，10％氯化钾家兔耳缘静脉注入5～10ml，狗前肢或后肢下静脉注入20～30ml，即刻动物发生死亡；静脉内注入一定量的福尔马林溶液、使血液