- 1、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
- 4、该文档为VIP文档,如果想要下载,成为VIP会员后,下载免费。
- 5、成为VIP后,下载本文档将扣除1次下载权益。下载后,不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 6、成为VIP后,您将拥有八大权益,权益包括:VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 7、VIP文档为合作方或网友上传,每下载1次, 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等,对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
表2蛋白质含量测定方法小结方法名称基本原理优点缺点凯氏定氮法氮元素在蛋白质分子中含量约为16%,故测定出蛋白质分子中氮元素含量再乘以6.25即为蛋白质含量测定简单快捷只有在被测物的组成是蛋白质时才能用此方法来估算蛋白质含量。其他任何含氮物质均会影响结果。该法曾经是经典的标准方法,但现已不多用双缩脲法蛋白质在碱性条件下与CuSO4发生双缩脲反应生成紫红色化合物,该化合物在540-560nm处比色即可求得蛋白质含量该法简便迅速,不受蛋白质特异性的影响该法灵敏度较差,所需样品浓度需在0.2-1.7mg/mLFolin-酚法(Lowry法)碱性铜试剂与蛋白质肽键发生双缩脲反应后,蛋白质中酪氨酸的酚基容易与磷钼酸和磷钨酸反应生成蓝色物质,在500nm处比色即可得蛋白质含量该法灵敏度非常高,为25-250μg/mL,比双缩脲法的灵敏度高100倍各种蛋白质显色强度有所不同;酚类和柠檬酸对于测定有干扰;Folin酚试剂乙的配制十分麻烦、复杂考马斯亮蓝结合法(Bradford法)考马斯亮蓝能与蛋白质的疏水区相结合,结合后现蓝色,在595nm处比色即可得到蛋白质含量该法灵敏度更高,大约比Lowry法高四倍;测定快速简便;干扰的物质少该法用于不同蛋白质测定时有较大的偏差;大量的去污剂如SDS会严重干扰测定紫外吸收法蛋白质分子中酪氨酸、色氨酸在280nm处有最大吸收值,各种蛋白质中这几种氨基酸含量差别不大,但由于蛋白质样品中常含核酸类物质,故应分别测定280nm和260nm处的吸光值,并利用经验公式:蛋白质质量浓度 1.45A280-0.74A260,依此得到蛋白含量该法十分简便,测定迅速,样品可回收样品蛋白质中酪氨酸含量与标准蛋白质相比差别较大时测定有误差,且测量的准确度不是很高
文档评论(0)