壳聚糖基分子印迹磁性微凝胶的制备及释药特性.docVIP

壳聚糖基分子印迹磁性微凝胶的制备及释药特性 唐春燕 王红飞 张黎明 中山大学化学与化学工程学院 广州510275 摘要：分子印迹凝胶(MIHs)在分离、催化、传感等领域有重要应用，近年倍受关注。本研究以羧甲基壳聚糖为功能聚合物母体，京尼平为交联剂，经硅氧烷改性的Fe3O4粒子为磁性组分，采用油包水（W/O）反相乳液法制新型咖啡因印迹磁性微凝胶（Fe3O4@SiO2@MIHs）和非分子印迹磁性微凝胶（Fe3O4@SiO2@non-MIH）。IR、XRD、SEM、荧光 关键词:分子印迹微凝胶 壳聚糖;京尼平;药物释放 前言 分子印迹技术（molecular imprinting technique, MIT）是制在空间结构和结合位点上与模板分子匹配的材料分子印迹(molecularly imprinted materials , MIMs)的，常被形象的描述为制造识别“分子钥匙”的“人工锁”技术。分子印迹材料由于制备简单、功能可设计、坚固耐用而被誉为“万能的分子识别材料”，在传感、模拟酶、催化、离等领域得到了广泛的应用。 传统经粉碎、过筛等获得形状不规则、粒径分布宽，且粉碎过程中会破坏部分识别位点，产率较低。因此，结构小尺寸更高的亲和力、选择性发展趋势。 近年来，具有超顺磁性的材料在生物医学和生物科技方面收到人们的广泛关注，包括靶向药物输送、核磁共振成像（MRI）对比增强、生物传感器、快速环境和生物分离、痕量特定目标物质的浓缩。[]赋予分子印迹材料磁性能，将扩大其应用范围。 MIs的传统应用领域是基于他们的选择吸附特性，但对MIs的解吸附性能的研究则是一个相对较新的领域。一些早期的研究表明这些具有亲和性的材料可能在药物控制输送中具有潜在的应用价值。[]将MIs应用于药物输送上可能实现药物智能释放或者药物靶向输送。 在药物输送应用，使用制备分子印迹材料极大兴趣。壳聚糖是通过碱化处理几丁质而部分去乙酰基的聚多糖，而几丁质是自然界中最丰富的生物材料之一，它在生物医学上的应用已经得到了广泛的研究。京尼平作为一种新的天然交联剂，可以从栀子的果实中分离。京尼平[6] 本研究将分子印迹技术磁性、药物释放用油包水反相乳液法制备分子印迹磁性微凝胶。 1. 实验材料 壳聚糖（Mr=190000-310000，85-90%的脱乙酰度）Aldrich，京尼平Wako Pure Chemical Industries Ltd，KH-550江汉化学厂有限公司，吐温、司班、茶碱、咖啡因均由Alfa Aesar提供，其他未列出的试剂均为分析纯，由广州光华化学厂有限公司提供。 2. Fe3O4纳米粒子的制备 FeCl2·4H2O、5.41 g FeCl3 ·6H2O分别溶于20 mL水中，然后在强烈的机械搅拌下把两种铁盐溶液混合均匀。在室温下将200mL 0.6 M的NH4OH溶液加入到混合溶液中去，然后加入30 mL浓缩的氨水（25 w/w %）以保持反应的pH值在11到12之间。生成的棕褐色物质继续在室温下搅拌1 h后升温回流1 h，整个制备过程都是在氮气的保护下进行的。生成的Fe3O4纳米粒子用永久磁铁分离，倾去上层液，然后用水和乙醇洗涤所得的粒子，最后把它重新分散在50 mL纯水中。 3. Fe3O4@SiO2-NH2粒子的制备 将2 mL氨水(25 %)、10 mL水、3 mL先前制备的磁性纳米粒子溶液、10 mL乙醇溶液混合均匀，在机械搅拌的情况下向混合溶液中加入KH-550的乙醇溶液（1mL KH-550溶于15 mL乙醇中），室温下持续反应6 h。生成的粒子用磁铁分离，水洗去过量的反应物，然后重新分散在25 mL纯水中。 4. 羧甲基壳聚糖CMCS的制备 在室温下，将5.0 g壳聚糖加入到50 mL的异丙醇中，搅拌30 min后加入12.5 mL的氢氧化钠溶液。然后向混合溶液（其中氢氧化钠的浓度为13.3 M）中逐滴加入含25 g氯乙酸的异丙醇溶液，然后升温到60 ?C继续反应4h。产物用乙醇沉淀后洗涤至中性，真空干燥。 5. Fe3O4@SiO2@MIH磁性微凝胶的制备 将一定量的Fe3O4@SiO2-NH2粒子和咖啡因加入到2%的CMCS水溶液中进行充分的相互作用，然后在搅拌下将混合溶液加入到正己烷（含有2%的Span80和1%的Tween20）中乳化半小时。将一定量的京尼平甲醇溶液（100mg/mL）逐滴加入到混合液中，室温下反应24 h。反应结束后用永性磁铁分离产物，并用乙醇和水反复洗涤以去除表面活性剂和未包裹Fe3O4@SiO2的MIHs。在相同的实验条件下，不加模板分子咖啡因制得非印迹的微凝胶Fe3O4@SiO2@non-MIH。将制得的MIH及non-MIH用乙酸/甲醇溶液（体积比为1/9）浸泡24 h洗脱，之后用甲醇洗，最后用去