chapter7 真核基因表达与调控3.pptVIP

RNA沉默与其他基因表达抑制技术的比较 　　RNA沉默属于一种基因表达抑制技术，能够使基因的表达受到抑制甚至完全不表达。 基因表达抑制技术从作用机理上可分为DNA水平上的抑制(基因打靶、转座子标签和T-DNA插入等)、转录水平上的抑制(调控区甲基化等)和转录后水平上的抑制(反义RNA和RNA沉默等)。在基因功能研究中，RNA沉默与其他几种基因表达抑制技术相比有明显的优越性。首先，它比反义RNA技术效率更高，能在低于反义RNA几个数量级的浓度下使目标基因表达降到极低的水平甚至完全“剔除”，因此更容易产生功能降低甚至缺失的突变；其次，与T-DNA和转座子标签技术相比，不存在插入位点随机性的问题，理论上任何基因都可被针对性的dsRNA特异性沉默；最后，应用同源重组进行的基因敲除效率非常低，且打靶载体构建所需的同源序列较长，而RNA沉默高效并且需要的同源序列则较短。Wesley等[利用hpRNA载体产生的RNA沉默，98bp长的同源序列即可产生有效地RNA沉默。 Mechanism of small RNA action miRNA siRNA Dicer Ago RISC RdRP TGS PTGS Key terms Key Concepts Small RNA 最大的一类 AGO蛋白决定RNA沉默功能 对双链RNA或茎—环结构RNA进行剪接 C