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课题2 多聚酶链式反应扩增DNA片段
课时训练13 多聚酶链式反应扩增DNA片段
1.PCR过程与细胞内的DNA复制过程相比,主要有两点不同,它们是( )。
①PCR过程需要的引物是人工合成的单链DNA或RNA ②PCR过程不需要DNA聚合酶 ③PCR过程中DNA的解旋不依靠解旋酶,而是通过对反应温度的控制来实现的 ④PCR过程中,DNA不需要解旋,直接以双链DNA为模板进行复制
A.③④ B.①②
C.①③ D.②④
解析:PCR过程与细胞内的DNA复制过程相比较,主要有两点不同:(1)PCR过程需要的引物是人工合成的单链DNA或RNA,长度通常为20~30个核苷酸。(2)PCR 过程中,DNA解旋不依赖解旋酶,而是通过对反应温度的控制来实现的。
答案:C
2.PCR技术中,引物的作用是( )。
A.打开DNA双链
B.催化合成DNA子链
C.使DNA聚合酶能够从引物的3端开始复制
D.提供模板
解析:DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,而只能从3端延伸DNA链,引物的作用就在于此。
答案:C
3.下列关于DNA双链的叙述,错误的是( )。
A.通常将DNA的羟基末端称为5端,而磷酸基团的末端称为3端
B.通常将DNA的羟基末端称为3端,而磷酸基团的末端称为5端
C.通常DNA聚合酶只能从3端延伸DNA链
D.通常DNA聚合酶不能从5端延伸DNA链
解析:为了明确DNA分子的方向,通常将DNA的羟基末端称为3端,而磷酸基团的末端称为5端。
答案:A
4.下列有关PCR的描述,不正确的是( )。
A.PCR技术的原理是DNA复制
B.用PCR技术扩增DNA是一个酶促反应,需耐高温的解旋酶和DNA聚合酶
C.一个DNA片段经PCR扩增,可形成2n个DNA片段(n代表循环次数)
D. PCR利用了DNA的热变性来控制DNA的解旋与结合
解析:PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术,它以极少量的DNA为模板,以四种脱氧核苷酸为原料,在引物作用下使DNA聚合酶从引物的3端连接脱氧核苷酸,短时间内迅速复制上百万份的DNA拷贝。PCR利用DNA在不同温度下变性解聚或复性的特性来解旋并结合引物,不用解旋酶解旋。
答案:B
5.在PCR实验操作中,下列说法不正确的是( )。
A.在微量离心管中添加各种试剂时,只需一个枪头
B.离心管的盖子一定要盖严,防止液体外溢
C.用手轻弹离心管壁的目的是使反应液充分混合
D.离心的目的是使反应液集中在离心管底部,提高反应效果
解析:在微量离心管中添加各种试剂时,每吸取一种试剂后,移液器上的枪头必须更换,确保实验的准确性;离心管的盖子一定要盖严,防止实验中脱落或液体外溢;离心10 s的目的是使反应液集中在离心管底部,提高反应效果。
答案:A
6.DNA检测技术可应用于亲子鉴定、遗传病检测等领域。DNA检测离不开对样品DNA的PCR扩增。不同样品DNA的扩增过程或条件不同的是( )。
A.引物 B.DNA聚合酶
C.四种脱氧核苷酸 D.预变性的温度
解析:不同的样品DNA有不同的核苷酸序列,由于引物能与模板DNA(样品DNA)按照碱基互补配对原则结合,因此不同样品DNA所需的引物有不同的核苷酸序列。
答案:A
7.下面关于DNA光吸收特点或DNA含量计算的叙述正确的是( )。
A.DNA主要吸收蓝紫光
B.DNA主要吸收红橙光
C.可根据DNA在260 nm紫外线波段光吸收值的多少推算DNA的含量
D.计算DNA含量的公式可表示为“50×紫外分光光度计260 nm的读数”
解析:DNA主要吸收波长为260 nm的紫外线,可据光吸收量的多少推算DNA的含量,公式可表示为“DNA含量(μg/mL)=50×(紫外分光光度计260 nm的读数)×稀释倍数”。
答案:C
8.在PCR扩增的实验中,加入一种提取物(一种模板DNA片段),但实验得到的产物却有两种DNA。其原因可能是( )。
A.基因突变
B.Taq DNA聚合酶发生变异
C.基因污染
D.温度过高
解析:发生题述状况的原因是基因污染。因此,在PCR实验中,一定要做到隔离操作区、分装试剂、简化操作程序、使用一次性吸液枪头等,尽量避免基因污染。
答案:C
9.在进行DNA亲子鉴定时,需大量的DNA。PCR技术(多聚酶链式反应)可以使样品DNA扩增,获得大量DNA克隆分子。该技术的原理是利用DNA的半保留复制,在试管中进行DNA的人工复制(如下图,图中短粗线是引物)。在很短的时间内将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍,使实验室所需的遗传物质不再受限于活的生物体。
(1)图中的变性、延伸分别是指 、 。?
(2)假设PCR反应中的DNA模板为P,第一轮循环的产物2个子代DNA为N1,
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