血糖（Glu）的测定—干扰预试验及实验.pptVIP

干扰试验-血糖（Glu）的测定 （葡萄糖氧化酶法）  2、原理 用来衡量测定方法准确度，用于测定某物质加到样品中产生的系统误差。在加入一定浓度干扰物的条件下，形成恒定系统误差，误差的实际大小随干扰物的浓度而变化。 。 干扰物浓度不同，误差的大小也不同 干扰试验即用于检验某方法的特异性，也用于检测干扰物质对方法的干扰作用，以评价分析方法的准确性。 采用维生素C作为GOD-POP法测定血糖的干扰物质，当干扰物的浓度达到一定量时，将对相应的实验产生干扰。 维生素C可以和GOD反应生成的H2O2发生还原反应，影响H2O2参与第二步POD的反应，从而降低显色反应，产生分析误差。 3、葡萄糖测定原理 β-D-葡萄糖+O2+H2O D-葡萄糖酸+H2O2 （GOD：葡萄糖氧化酶） H2O2+4-AAP+酚 2H2+红色醌类化合物 （4-AAP： 4氨基氨替比林） （POD：过氧化物酶） 二、样品制备 三、测定方法1、加样 试剂 校准（S） 空白（B） 基础样品 干扰管1 2 3 校 准 液 （ml） 0.03 — — — — — 蒸 馏 水（ml） — 0.03 — — — — 基础样品 （ml） — — 0.03 — — — 干扰样品1（ml） — — — 0.03 — — 干扰样品2（ml） — — — — 0.03 — 干扰样品3（ml） — — — — — 0.03 工作试剂 （ml） 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 各管充分混匀置37水浴10分钟后室温冷却。 五、结果判断 干扰值即偏差，对于血糖测定来说，当干扰物引起的偏差在总允许误差的1/4范围内，则不会影响测定结果的临床应用价值，可以近似认为当干扰物浓度低于该浓度时不会对血糖测定产生影响。 六、注意事项 干扰物对测定的影响与被分析物浓度无关，而与干扰物本身的浓度有关，所以产生的恒定系统误差； 如要区别是干扰还是方法的特异性差，可用干扰物的纯溶液作为样本测定，如仍形成干扰值，则属侯选方法的特异性差。 * * 1. 评价实验 准确度的评价：方法比较试验、回收试验和干扰试验。 精密度的评价：批内重复性试验、日内重复性试验、日间重复性试验、患者样本的平行双份测定。 - 0.1(250mg/L) 0.9 样品Ⅲ （ml） - 0.1(500mg/L) 0.9 样品Ⅱ (ml) - 0.1(750mg/L) 0.9 样品Ⅰ (ml) 0.1 - 0.9 基础血清（ml） 蒸馏水 维生素C 血清 干扰样品 2、分光光度计测定方法：波长505nm，以空白管调零，测定标准管和各样品管吸光度值，按公式计算测定结果。 四、计算与数据处理 ⑴计算公式： Glu含量（mmol/L）= ×Cs 其中：Cs=5.55 mmol/L 干扰物加入量 = 干扰值（mmol/L）= 干扰样品测定值-基础样品测定值 干扰率（%）= 干扰值/基础值×100 ⑵干扰试验的数据处理： 样品（ml） GLU测得值(mmol/L) 干扰物值加入量(mmol/L) 干扰值(mmol/L) 干扰率(%) 基础样品 — — — 干扰样品1 干扰样品2 干扰样品3