猪精子冷冻损伤研究进展.pdfVIP

中国生物工程杂志　ＣｈｉｎａＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１０，３０（７）：８６９１ ? 猪精子冷冻损伤研究进展 １，２ ２ ２ ２ ２ １ １ ２ 陈晓丽 　朱化彬 　郝海生 　杜卫华 　赵学明 　孙艳艳 　胡传活 　王　栋 （１广西大学动物科技学院　南宁　５３０００４） （２中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 农业部畜禽遗传资源与利用重点开放实验室　北京　１００１９３） 摘要　综述了猪冻存精子顶体、质膜和线粒体的形态学变化及其对精子受精能力的影响，同时分 析了冻融精子中所发生的蛋白质、ＤＮＡ等生物大分子的变化及其可能对冻存精子质量及受精能 力的影响，指出冷冻保存过程对精子蛋白质、ＤＮＡ等生物大分子质和量的影响是精子冷冻损伤的 实质，应用先进的蛋白组学进行猪精子冷冻损伤机理研究，有助于深刻揭示冷冻损伤的分子机 理，为推动猪精液冷冻保存技术研究取得突破性进展提供理论依据。 关键词　猪　精子　冷冻损伤 中图分类号　Ｑ７１ 　　随着人工授精技术在现代养猪业中的普遍应用， 头部细胞核、颈部和尾部等的整体结构并没发生大的 猪精液冷冻保存技术也取得了一定进展。但大量研究 ［６］ 变化 ，但精子质膜、顶体和线粒体等结构发生很大变 显示，猪精子超低温冷冻保存后受精能力明显下降，人 化，精子结构的完整性遭到一定程度破坏，影响到了精 ［１］ 工授精的受胎率一直很低 ，所以，世界上应用猪冷冻 子的正常代谢及正常生理功能的发挥，进而影响到受 ［２３］ ［７］ 精液进行人工授精所占比例不到１％ 。尽管从冷冻 精能力 。 保护剂筛选和冷冻程序优化等方面进行了大量研究， １．１　顶体的冷冻损伤 但一直没有取得突破性进展［４］。越来越多的研究表 　　顶体位于精子头部顶端，由高尔基体特化而来，含 明，猪精子在组成上不同于牛，对冷刺激的敏感度远高 有酸性磷酸酶、蛋白水解酶、透明质酸酶等各种水解 于牛，因冷冻引起的损伤也更严重，冷冻损伤机理不明 酶，其功能类似于一种特化的溶酶体。顶体受损直接 严重限制了猪精液冷冻保存技术的研究进展，影响了 影响到顶体内容物的适时和有效释放，影响了精子穿 养猪业的发展。因此，有必要对猪精子各种损伤类型 过放射冠、透明带及其与卵细胞的结合，使受精过程受 ［８］ ［９］ 进行分析，通过深入研究冻融精子的超微结构变化和 阻 。吴永孝等 通过对４个品种牛精子冻融后立即 损伤的化学本质，阐明冷冻损伤的分子机理，为探索新 制片和冻融后３７℃恒温培育２ｈ后制片，对比分析了顶 的冷冻方案和提高猪精液冷冻保存效率提供理论 体的形态学变化，结果，两种情况下顶体形态总畸形率 依据。 均显著高于原精，证明超低温冷冻保存严重损伤了精 子顶体，冻融精子活率虽然很高，但由于顶体遭到了不 １　冻存精子的形态学变化 同程度的破坏，受胎率反而比较低。 　　猪精子因冻融损伤，活力明显低于原精，即使以最 　　精子表面含有一种来自精清的糖蛋白，可有效防 适宜的方法解冻，也只有极少数精子恢复活力，解冻后 止获能的发生，而当精子进入雌性生殖道并向受精地