实验12 植物叶绿体色素的提取、分离、 表征及含量测定.pdfVIP

厦门大学《综合化学实验》电子教材 实验 12 植物叶绿体色素的提取、分离、 表征及含量测定 （一）叶绿体色素的提取 一、 实验 目的 1．掌握有机溶剂提取叶绿体色素等天然化合物的原理和实验方法 。 2．了解皂化-萃取提取β−胡萝卜素原理。 3. 了解 1,4-二氧六环沉淀法提取叶绿素原理 。 二、 实验原理 植物光合作用是自然界最重要的现象，它是人类所利用能量的主要来源 。在把光能转化 为化学能的光合作用过程中，叶绿体色素起着重要的作用 。高等植物体内的叶绿体色素有叶 绿素和类胡萝卜素两类 ，主要包括叶绿素 a、叶绿素 b、β−胡萝卜素和叶黄素 四种。它们所 呈现的颜色和在叶绿体 中含量大约 比例见表 12.1。 表 12.1 高等植物体内叶绿体色素的种类 、颜色及含量 色素名称 叶绿素 类胡萝卜 素 项 目 叶绿素 a 叶绿素 b β−胡萝卜素 叶黄素 颜色 蓝绿色 黄绿色 橙黄色 黄色 在叶绿体 内各色素 3 1 2 1 含量比例 3 1 叶绿素 (chlorophylls)是叶绿酸的酯，它在植物进行光合作用 中吸收可见光，并将光能 转变为化学能。叶绿素是植物进行光合作用所必需的催化剂。在绿色植物中叶绿素主要以叶 绿素a （C H O N Mg）和叶绿素b （C H O N Mg）两种结构相似的形式存在，其差别仅是叶绿 55 72 5 4 55 70 6 4 素a中一个 甲基被叶绿素b中的甲酰基所取代 。叶绿素 的基本结构见 图 47.1。在叶绿素分子结 构中含有 四个吡咯环 ，它们由四个 甲烯基联结成卟啉环，在卟啉环 中央有一个镁原子，它 以 两个共价键和两个配位键与四个吡咯环的氮原子结合成 内配盐，形成镁卟啉。在叶绿素分子 中还有两个羧基，其 中一个与甲醇酯化成COOCH ，另一个与叶绿醇酯化成COOC H 长链。 3 20 39 1 厦门大学《综合化学实验》电子教材 类 胡 萝卜素(carotenoids) 是 一 类 不 饱 和 的 四萜 类 碳 氢 化 合 物 （例 如 胡 萝 卜素 ， carotenes)，或它们 的氧化衍生物 （例如叶黄素类，xanthophylls)。所有 的类胡萝卜素均源 于非环状 的C H 结构。类胡萝卜素在强光下可防止叶绿素 的光氧化；在弱光下 ，可作为辅助 40 56 色素吸收光能并传递给叶绿素分子。胡萝卜素有三种异构体， 即α−、β−和 γ−胡萝卜素，其 中 β−胡萝卜素含量最多，也最为重要。β− 胡萝卜素还具有维生素A的生理活性，其结构是 由两分子维生素A在端链失去两分子水结合而成。在生物体内，β−胡萝卜素受酶催化氧化即 形成维生素A。叶黄素 (3，3`-二羟基- α-胡萝卜素，lutein，C H O )是一种常见的氧化型