肌成纤维细胞在大鼠排卵机制中的作用.docVIP

肌成纤维细胞在大鼠排卵机制中的作用 暨南大学附属第一医院妇产科 硕士研究生 金素芳 导 师 王自能教授 中 文 摘 要 目的： 1.确认在大鼠卵巢卵泡膜中有肌成纤维细胞存在 2.探讨肌成纤维细胞与卵巢排卵的关系 方法： 1.采用免疫组织化学方法检测α-SMA、desmin 、vimentin、ET-AR和 ET-BR在动情期组（n=20）与非动情期组（n=10）大鼠卵巢各级卵泡（窦前卵泡、小窦状卵泡和大窦状卵泡）卵泡膜细胞中的表达情况，并进行图像分析。 2.采用透射电镜技术观察动情期大鼠窦状卵泡卵泡膜细胞的超微结构。 结果： 1.免疫组织化学结果： 1.1.α-SMA表达于动情期和非动情期各级卵泡的卵泡膜细胞中，其表达强度在组间同级卵泡间比较有显著性差异（P0.05）,组内各级卵泡间比较也有显著性差异（P 0.05）；在动情期组其表达强度与卵泡直径大小成正相关（r=0.631），而非动情期组两者却几乎无相关性（r=-0.087）。 1.2.Desmin在动情期组各级卵泡的卵泡膜细胞中表达，其表达强度在该组各级卵泡间比较有显著性差异（P 0.05）：在非动情期组各级卵泡的卵泡膜细胞中无表达。 1.3.Vimentin表达于动情期和非动情期各级卵泡的卵泡膜细胞中，其表达强度在组间同级卵泡间比较有显著性差异（P 0.05）。动情期组各级卵泡间比较有显著性差异（P 0.05）而且vimentin表达强度与卵泡直径大小呈正相关（r=0.536）；非动情期组窦前卵泡和小窦状卵泡间比较无明显差异（P 0.05），其他级别卵泡间比较有显著性差异（P 0.05）,而且vimentin表达强度与卵泡直径大小无明显相关性（r=0.224）。 1.4.ET-AR表达于各级卵泡的卵母细胞﹑颗粒细胞及间质细胞﹑血管内皮细胞和动情期卵巢的生发上皮细胞，两组中窦前卵泡的卵泡膜细胞中均无表达，小窦状和大窦状卵泡的卵泡膜细胞均有表达，组间同级卵泡间比较有显著性差异（P 0.05），两组内卵泡间比较有显著性差异（P 0.05）。 1.5.ET-BR 表达于各级卵泡的卵母细胞及血管内皮细胞，动情期组在各级卵泡卵泡膜细胞中无ET-BR的表达，非动情期卵泡膜细胞中除大窦状卵泡的卵泡膜细胞中有表达外其它均未见表达，同时大黄体的黄体细胞中发现有表达。 2.电镜观察结果： 动情期窦状卵泡卵泡膜细胞纵切呈长梭形，该细胞的细胞核两端有丰富的粗面内质网及线粒体，常有糖原颗粒聚集，胞浆中含有直径为5～10nm的微丝束，有时形成电子致密斑，细胞膜下可见许多吞饮小泡，细胞核不规则有许多切迹，细胞间有细胞连接，细胞基底膜不完整。 结论： 1.α-SMA﹑desmin vimentin均表达于动情期大鼠卵泡膜细胞中，说明肌成纤维细胞存在于大鼠卵泡膜中。随着卵泡的成熟增大，三者在卵泡膜细胞中的表达强度逐渐增强，在大窦状卵泡中表达最强，推测肌成纤维细胞在排卵过程中发挥重要作用。 2.动情期窦状卵泡卵泡膜细胞的超微结构特点,也符合肌成纤维细胞的形态特征,进一步证明肌成纤维细胞存在于大鼠卵泡膜中。 3.ET-AR在动情期大鼠大窦状卵泡卵泡膜细胞中表达最强，推测ET-1与该受体结合后可通过促进肌成纤维细胞的形成及增强它的收缩功能而使肌成纤维细胞在排卵时卵泡壁的破裂过程中起作用；ET-BR表达于非动情期大鼠大窦状卵泡卵泡膜细胞中可能介导肌成纤维细胞舒张，两者共同调节肌成纤维细胞在排卵过程中的作用。另外ET-AR表达于各级卵泡的卵母细胞﹑颗粒细胞， ET-BR表达于各级卵泡的卵母细胞，两者可能共同参与卵泡的成熟过程 。 关键词： 肌成纤维细胞； ET-AR； ET-BR；排卵；免疫化学；超微结构 The role of myofibroblasts in theca layer of rat ovary during ovulation Dept.of Obstet﹠Gynecol The First Affiliated Hospital of Jinan University M Candidate:SuFang Jin Supervisor Professor Dr.med.Habil.Tzuneng Wang Objectives: 1.To confirm the presence of myofibroblasts in ovarian theca layer in ovulation 2.To study how myofibroblasts play its role during ovulation Methods:. 1.Tissue of rat ovary was obtained from 30 healthy sexually