耐力运动对ICR小鼠心肌线粒体生物发生的影响.pdfVIP

论 文 摘 要 研究发现，在规律性的运动锻炼之后，心肌的功能和形态发生了较大程度的 适应性变化，从微观角度来看，最显著的变化就是来自线粒体，线粒体的数量增 多，相关酶活性改善，从整体上增强了线粒体的功能和数目，即线粒体生物发生。 线粒体发生过程非常复杂，需要核DNA与线粒体DNA的协调控制。目前已有大 量研究表明，核呼吸因子(NRF)家族和雌激素受体 （ERR ）家族等核转录因子控 制着核呼吸基因以及线粒体呼吸基因的表达，线粒体转录因子Tfam、TFBMs等 调节着线粒体DNA的转录和复制水平，以及PGC-1家族等转录辅活化因子在这两 大类因子之间的整合调节作用。 PGC-1家族在机体对长期运动的适应性变化过程中发挥着关键性的作用。 PGC-1α可以辅助激活核呼吸因子NRFs ，调节多种核编码的线粒体代谢相关基因 和Tfam、TFBMs等线粒体转录因子的表达。线粒体转录因子Tfam、TFB1M及 TFB2M调节着mtDNA 的转录和复制，从而调控线粒体DNA编码的多种线粒体能 量代谢相关因子的表达，促进线粒体的生物发生。 基于PGC-1家族的重要生理功能及其与Tfam、TFBMs线粒体转录因子在线粒 体生物发生中的重要作用， 本实验试图通过研究耐力运动对不同月龄小鼠心肌 线粒体中PGC-1α/β、Tfam、TFBMs等基因表达及mtDNA含量的影响，进而探讨 耐力运动对线粒体生物发生的影响，从而为耐力运动改善机体机能提供一定的理 论依据。 目的：比较耐力运动对二月龄和十月龄 ICR 小鼠心肌线粒体中 PGC-1α、 PGC-1β、Tfam、TFB1/2M 基因转录以及 mtDNA 含量的影响，从基因转录水平 和线粒体 DNA 含量的角度探讨耐力运动对心肌线粒体生物发生的影响。 方法：将 32 只雄性 ICR 小鼠进行适应性训练一周后，随机分成二月龄安静 组 （YC ）和二月龄运动组 （YE ）、十月龄安静组 （OC ）、十月龄运动组 （OE ） 四组，每组各 8 只。对不同月龄小鼠采用递增负荷运动能力测试，YE 、OE 两组 小鼠按最大负荷的 65%~75% 进行 4 周的跑台训练，每周训练 6 天，每天一次， 每次训练 1h。所有小鼠末次运动 24h 后统一处死，取心肌组织，提取心肌总 DNA， 检测 ATPase6 、mt1000 和 cytB 的拷贝量；提取取心肌总 RNA，检测 PGC-1α、 PGC-1β、Tfam、TFB1/2M 基因转录水平；提取心肌线粒体，检测其中的 ROS 水平。 结果： （1）YE 组与 YC 组小鼠相比，OE 组与 OC 组小鼠相比，体重均无显著差异。 （2 ）YE 组与 YC 组小鼠相比，心肌线粒体 ROS 水平上调；OE 组与 OC 组小 鼠相比，心肌线粒体 ROS 水平下调。 （3 ）YE 组与 YC 组小鼠相比，OC 与 YC 相比，心肌 mtDNA 含量均无明显 差异；OE 组与 OC 组小鼠相比，心肌 mtDNA 含量显著上调。 （4 ）YE 组与 YC 组小鼠相比，心肌中 PGC-1α 和 PGC-1β 的mRNA 表达无明 显差异；OE 组与 OC 组小鼠相比，PGC-1β mRNA 表达水平显著上调，而 PGC-1α mRNA 表达水平显著下降。 （5 ）YE 组与 YC 组小鼠相比，心肌 Tfam、TFB1M 和 TFB2M 的 mRNA 转 录水平无明显差异；OE 组与 OC 组小鼠相比，心肌 Tfam、TFB1M 和 TFB2M 的 mRNA 转录水平上调。 结论： （1）耐力训练可促进十月龄 ICR 小鼠心肌线粒体的生物发生，小鼠心肌线粒 体的生物发生可能还受到年龄的影响。 （2 ）耐力训练诱导的小鼠心肌线粒体的生物发生可能与PGC-1α、PGC-1β、 Tfam、TFB1M和TFB2M等基因有关。其中，PGC-1α可能起到维持心肌线粒体正 常稳态的功能，而PGC-1β更多参与了心肌对长期耐力训练的慢性适应，Tfam、 TFB1M和TFB2M对mtDNA 的转录和复制在心肌线粒体生物发生的运动适应中 发挥重要的作用。 关