结直肠癌IGF2印记丢失与H19+DMR甲基化状态的相关性研究.pdfVIP

中文摘要 中文摘要 目的:基因组印记 是指控制某一表型的一对等位基因由于亲 源的不同而呈差异性表达,即机体仅转录来自亲本一方的等位基因而与自身性别无 关。所谓印记丢失 ,是指被印记的无活性的等位基因被重新激活。胰岛素样生长因子. ,基因是父源表达的印记 基因,编码一个强有力的有丝分裂原,促使细胞增殖。在多种成人肿瘤中都发现有 的发生,意味着胰岛素样生长因子表达加倍,可促使细胞恶性增殖与转化,参 与肿瘤的发生。印记基因的表达取决于位于染色体上差异甲基化区 域的甲基化模式。 方法:我们检测了个结直肠癌病人和个正常对照的记情况。以 酶切位点的限制性片段长度多态。生 , 确定样本的基因型,确定用于和甲基化分析的信息样本。结合 检测信息样本的印记状态;另外,我们用亚硫酸盐测序的方法分析了个结直肠 癌病人/甲基化差异区域第六个结合因子结合位点的甲基化情况。 结果:在个肿瘤样本中有个显示了双等位基因表达,即印记丢失, 然而,在正常对照的个样本中只有个显示了的印记丢失,在肿瘤样本和 正常对照之间印记丢失率有统计学差异。在肿瘤样本中印记保持和印记丢失组之间我 ..,.。 们发现甲基化状态有着统计学差异.. 结论:研究的结果提示印记丢失在结直肠癌致癌过程中起着重要作用。 /甲基化差异区域第六个结合因子结合位点的低甲基化同 印记丢失相关联并且维持印记的一增强子竞争模型不适用于人类结直 肠癌。 关键词:胰岛素样生长因子,,印记丢失,甲基化差异区域 :. .?. ,, . ,? . :. ,. , ?. , ? /.:,, . .. ..,.. : . ?/ 一 . . :, , ,目录 目录’ 中文摘要? ..............................??.....??..............................?.?.................?..................?..... 符号说明?Ⅳ 第章 前言??.. . 基因.. . . /印记丢失与??. 第章基因分型 . 材料 .方法 . 结果 .讨论??.. 第章 与甲基化状态的相关性研究. 材料??.. .方法. 结果??.. .讨论??.. 第章 印记丢失,甲基化差异区域岛甲基化同临床指标的相关性分析? . 材料??.. .方法?。? . 结果??一 .讨念??一 第章 结论??. 参考文献? 在读期间发表的学术论文与研究成果??. 致谢. 符号说明 符号说明 Ⅳ第章前言 第章 前言 截止至岁,至少有%的西方人群会发生结直肠肿瘤,其中大约%发展为恶 性肿瘤?。流行病学研究显示根据显性遗传模式%发生结直肠癌。分子生物学最 近的进展显示许多基因涉及到结直肠癌发生过程。 基因『 是指体细胞来源于不同亲代的一对等位基因发生 的差异性表达。即机体仅表达来自亲本一方的等位基因,而另一方不表达或很少表达。 . 只在来源于父系的等位基因上获得表达母系印记 而只在来源于母系的等位基因上获得表达父系印记。由于矛交互印 记,基因定位相近,共用同一调控体系,且在个体生长、发育及行为发展方面有重要 作用,许多疾病的发生发展与两者的印记调控异常有关。 基因印记是基因调控的一种形式,一个基因的两个亲本等位基因差异表达【】。基 因印记被认识是表观遗传学现象,因为基因表达调控的发生没有序列的改变。 印记基因等位基因特异性表达被认为是以等位基因特异性表观修饰为基础的,例如胞 嘧啶甲基化【和组蛋白修饰甲基化,乙酰化,磷酸化和泛素化.。在胚胎和成人癌 症中正常印记状态的改变是一种常见的异常,涉及到最初特异基因表达的丢失,这种 现象叫做印记丢失。在多种成人恶性肿瘤中发现了印记丢失,包括卵巢癌.】,结直 肠癌,肺癌㈣和膀胱癌,还有慢性粒细胞白血病‘ 。基因印记丢失涉及到 结直肠癌发生过程。 . 基因 基因位于人染色体 .,全长,包括个外显子.和个内含 子;第卟显子内有一个彳以,多态性酶切位点,有、、、四个组织和发育 依赖的启动子,编码五种’非翻译区不同的成熟:调控.、,表达.;调控、,表达. ;调控、,表达.和 . 。 ;调控?,表达. 基因是最早发现的内源性印记基因之一,紧密连锁位于人.,两 者在不同亲本来源的染色体上共用位于下游的增强子。在母源等位基因上发 生印记而父源表达,其编码的胰岛素样生长因子是重要的促胚胎生长因子,通过自 分泌或旁分泌的方式作用于细胞,可调节胚胎及滋养层的生长发育,调控细胞增值和 分化【。有个启动子区域,其中启动子是最活跃的在胚胎肝中 多形性腺 瘤基因编码调控转录因子,通过结合启动子正向调控。虽然出生后正常组织中 表达下调,但是在各种类型的儿童和成人癌症中是过表达的,并且通过第章 自分泌和旁分泌机制作为肿瘤增强子。在过去十年,作为涉及结直肠