2单磷酸核苷酸的毛细管电泳分离研究碳酸胍体系中6种5prime.pdfVIP

( ) 第 32 卷 分析化学 FENXI HUAXUE 　研究报告 第 9 期 　　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　 2004 年 9 月 Chinese Journal of Analytical Chemistry 1175～1178 碳酸胍体系中 6 种 5′单磷酸核苷酸的毛细管电泳分离研究 周文峰　袁倬斌 ( 中国科学技术大学研究生院应用化学研究所 ,北京 100039) 摘 　要 　报告了在碳酸胍体系中研究 6 种 5′单磷酸核苷酸的分离工作 ,考察了分离条件对分离结果的影响。 在最佳条件下 , TMP 、AMP 、CMP 、GMP 、IMP 、UMP 等 6 种核苷酸的线性范围分别为 : 5～350 、2 ～300 、10～40 、 5～350 、10～400 和 10～400 mg/ L ; 其检出限分别为 :1 、0. 5 、2 、1 、2 和 2 mg/ L 。初步探讨了胍基与不同核苷酸之 间的相互作用及这种作用对毛细管电泳分离的影响。并将实验结果与普通碳酸盐体系作了比较。 关键词 　胍基化合物 ,毛细管电泳 ,核苷酸 1 　引　　言 核苷酸是一类重要的生物物质 ,参与细胞的代谢。细胞是生命的最小单位1 。磷酸根是核苷酸中 的基本组成部分。核苷酸的分析广泛应用于生物化学、药学及农业等领域中2 ～7 ,尤其在单细胞分析化 学的研究中占有极重要的地位。 NH ( ) 胍基化合物是指含有基团 NH C NH 的化合物或其衍生物。胍是最强的有机碱 p K = 136 , 2 a 在一般的生理环境中 ,它处于完全质子化状态 ,并且能在较大 pH 值范围内保持正电性8 。这种特殊的 性质使得胍基易于在配基与受体及酶与底物间通过氢键或静电作用形成特殊的相互作用。胍基化合物 对磷酸脂有着较高的亲和性 ,它与核苷酸之间的分子识别研究引起了关注9 。 迄今 ,在毛细管电泳对核苷酸的分离研究中 ,用 CE 研究胍基基团与核苷酸间的作用 ,在胍基化合 物体系中研究核苷酸的分离尚未见文献报道。考虑到碳酸胍是胍类化合物中简单且容易得到的一种 , 故选择在碳酸胍体系中研究 6 种 5′单磷酸核苷酸的分离 ,并考察了分离条件对分离结果的影响 ,初步 探讨了胍基与不同核苷酸之间的相互作用对毛细管电泳分离的影响 ,并将实验结果与普通碳酸盐体系 做了比较。 2 　实验部分 2 . 1 　仪器与试剂 ( ) ( ) ACS2000 型高效毛细管电泳仪 中科院研究生院应用化学所 ;高压电源 0～30 kV ;S200 型紫外检 ( ) (