原创力文档- 1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
( )
·794 · 中国病理生理杂志 Chinese Journal of Pathophysiology 2002 ,18 7 : 794 - 797
( )
[文章编号] 1000 - 4718 2002 07 - 0794 - 04
D - 半乳糖致原代培养神经元损伤模型的研究
蔡大勇 , 赵 雁 , 黄启福
(北京中医药大学病理教研室 ,北京 100029)
[摘 要] 目的:建立 D - 半乳糖致原代培养神经元损伤模型 ,为筛选益智药物提供药效学研究方法 。方法 :在
原代培养神经元的第 6 d ,加入 50 mmol/ L D - 半乳糖作用 72 h ,倒置显微镜下观察神经元的生长发育形态 ,MTT 法在
酶联免疫检测仪上检测神经元代谢率 ,PI 染色在流式细胞仪上检测神经元凋亡率 ,HE 染色观察神经元形态 、形态计
( )
量神经突起密度 , RT - PCR 检测醛糖还原酶信使 RNA AR - mRNA 含量 。比较正常对照神经元和受 D - gal 攻击神
经元之间的差别 。结果 :受 D - 半乳糖攻击神经元的生长发育显著迟缓 ; 代谢率从 0762 ±0030 ( n = 33) 降低到
0543 ±0064 ( n = 11) , P 001 ;凋亡率从 0060 ±0029 ( n = 19) 增高到 0356 ±0215 ( n = 19) , P 001 ; 出现变性坏
死的形态变化 ,神经突起密度从 0557 ±0042 ( n = 10) 降低到 0468 ±0033 ( n = 10) , P 001 ;无 AR - mRNA 的表达 。
结论 : 用 D - 半乳糖建立的原代培养神经元损伤模型稳定 、观察指标敏感 ,可用于老年性痴呆等神经系统疾病的研
究 。
[ 关键词] 半乳糖 ; 神经元 ; 大鼠; 阿尔茨海默病
[ 中图分类号] R74102 [文献标识码] A
( ) (
老年性痴呆 Alzheimer ’s Disease , AD 的发病率 GATCA GCACCTG - 3 ’,扩增产物大小为 180 bp 北京
高 ,对人类的生活质量影响大[ 1] 。现今复制的AD 动 赛百 盛 公 司 , 5OD ) , 一 步 法 RT - PCR 试 剂 盒
物模型与人类疾病状态不完全一致 。根据代谢障碍 (Promega) ,DGL20000 DNA - Marker ( 北京鼎国生物技
( )
和自由基损伤理论 ,长期大剂量使用 D - 半乳糖 D 术发展中心 。
- galactose , D - gal) 能使动物同时出现衰老和智力 2 神经元原代培养流程
低下的表现[ 10 ] ,D - gal 可致细胞损害 ,故建立 D - gal 21 正常大鼠血清的制备 雄性 Wistar 大鼠6 只 ,
原代培养的神经元损伤模型 ,拟用于 AD 研究[2 - 9 ] 。 以乙醚麻醉 ,从颈动脉取血 ,分离血清 ,分
文档评论（0）