基于rDNA的PCRRFLP及序列分析对四种螺旋线虫的分子鉴定.pdfVIP

农业生物技术学报，  年， 第  卷， 第  期， 第  页  2010 18 5 981~984 Journal ofAgriculturalBiotechnology,2010,Vol.18,No.5,981~984  研究报告  ALetter  基于  的 及序列分析对四种螺旋线虫的分子鉴定 rDNA PCR­RFLP 赵雷 郑炜 梅圆圆 郑经武 *  310029  浙江大学 生物技术研究所， 杭州，  * jwzheng@zju.edu.cn  通讯作者， 摘 要 利用  及序列分析等技术对来 自国内浙江、 山西、 山东以及德国等地  个不同 rDNA ITS­PCR­RFLP  6  螺旋线虫地理群体进行 了分类和鉴定 。结合形态学特 征分别鉴定为小头螺旋线虫（Helicotyle nchus microcep halus ） 、双角螺旋线虫 （H . digonicus ） 、双 宫螺旋线虫 （H. dihys tera） 和翅尾铗螺旋线虫（H. p teracerus ）。其中  个不同地理群体的双角螺旋线虫  产物片段长度和限制性内切酶酶切图谱相同， 其 3  PCR  余  个种的  产物长度稍大， 个螺旋线虫种的酶切图谱各不相同。选用的  种限制性内切酶  A lu 、 3  PCR  4  6  ( Ⅰ A v a 玉、 H ae 芋、H inf 玉、Msp 玉和 Rs a 玉组合能有效地鉴别四种螺旋线虫。这是我国有关该属线虫分子特征 ) 的首次报道。 关键词  ITS­PCR­RFLP， 小头螺旋线虫， 双角螺旋线虫， 双宫螺旋线， 翅尾铗螺旋线虫  Molecular Identification of Four Helicotylenchus  Species Based on  PCR­RFLP and Sequencing of rDNA  ZhaoLei  ZhengWei  MeiYuanyuan  ZhengJingwu*  Institute ofBiotechnology,ZhejiangUniversity,Hangzhou 310029,China  *Correspondingauthor, jwzheng@zju.edu.cn  DOI: 10.3969/j.issn.1674­7968.2010.05.024 Abstract  PCR­RFLP and seq uencing of rDNA ITS regions of six geographic populations in genus Helicotylenchus  were made. Four species, He licotylenchus microcep halus , H. digonicus, H . dihys tera, and H. p teracerus ,wereidentified.Both the sequence length and digestion patterns werethe same in the threepopulations  of H. digonicus .The digestion patterns varied indifferent four specices,whichwasidentified as H. mi