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业生物技术学报 Journal of Agricultural Biotechnology 2005,13 (4): 477~481
·研究论文·
生长抑素基因疫苗质粒pc /2 的构建、表达及免疫*
1 2 1 1 1, 3
曹少先 张文伟 茆达干 管 峰 杨利国 **
(1. 南京 业大学动物繁育研究所, 南京2 10095 ；2. 南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室, 南京2 10095;
3. 华中农业大学动物科技学院, 武汉430070)
摘要：为构建高免疫原性的生长抑素(somatostatin, SS)DNA 疫苗，将 基因插入到pc / 中乙 表面抗原(HBsAg) 基
因第 112~ 113 氨基酸残基密码子之间，构建含2 拷贝 的融合表达质粒pc /2 。酶切和测序鉴定表明，重组质粒pc /2 构
建成功。脂质体包裹法将pc /2SS 转染HeLa 细胞，ELISA 检测表达产物的SS 免疫反应原性。结果表明，融合目的基因在
， 。将 ，
HeLa 细胞获得表达 S/2SS 融合蛋白具有比S/SS 融合蛋白更强的SS 抗原抗体反应性 pc /2SS 免疫6 只大鼠后 2/3 的大
鼠产生了抗SS 抗体，结果证明，所构建的质粒pc /2 可以表达生长抑素，表达产物具有免疫原性。
关键词: 生长抑素；基因克隆；基因表达；基因免疫；大鼠
Construction, Expression and Immunization
of Somatostatin DNA Vaccine pc /2
CAO Shao-Xian1 ZHANG Wen-Wei2 MAO Da-Gan1 GUAN-Feng1 YANG Li-Guo1, 3**
gene was incorporated into coding region of gene of pc at site of amino acid sequence 112 and 113 to con-
struct a somatostatin(SS) expression vector pc with high immunogenicity. The plasmid pc was identified by restriction en-
donuclease digestion and sequencing, pc was then encapsulated in liposome and transfected into HeLa cells. The recombinant
protein was detected by an ELISA method. The expression vector was constructed successfully. The result showed that the recom-
binant gene could be expressed in HeL
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