DNA的提取和纯化-中国人类遗传资源.pdfVIP

中国人类遗传资源 DNA 提取和纯化技术标准操作规程 Standard Operat ion Procedure for Extraction and Purification of DNA （讨论稿） 中国人类遗传资源平台项目组 2006 年 1 月 I 前 言 近 10 年来，现代分子生物学技术越来越广泛地被用于人类疾病研究的各个领域，运用 DNA 提取和纯化技术的人员数量与日俱增。提取 DNA 的方法分为很多，根据不同类型标本或不同 实验目的，DNA 提取方法不尽相同。商业化 DNA 提取和纯化试剂也名目繁多 。为了合理有效 的利用我国人类遗传资源，结合实际工作需要，特制定一套行之有效、符合我国国情的 DNA 提取和纯化技术标准操作规程。 本规程包括实验室设置、工作区域功能和设备、样品的选择和保存、DNA 提取、DNA 质 量签定、DNA 标本保存、记录管理和注意事项及实验室安全。 本规程规定了人类遗传资源库 DNA 标本提取和纯化实验应遵守的操作规程。本规程适用 于所有向人类遗传资源库提交人基因组 DNA 标本的 DNA 实验室。本规程适用于从人体体液、 细胞、组织等标本大批量提取和纯化 DNA ，并包括对DNA 样本长期保存。 II 目 次 1 范围 1 2 规范性引用文件 1 3 术语和定义 1 4 实验室设置 2 5 工作区域功能和设备 3 5.1 试剂贮存和准备区 3 5.2 DNA提取区 3 5.3 DNA质量分析区 3 5.4 DNA标本保存区 4 6 样品的选择和保存 4 7 DNA 提取方法 4 7.1 酚-氯仿法 4 7.2 甲酰胺法 7 7.3 快速分离DNA方法 9 8 DNA质量鉴定 11 8.1 紫外分光光度计法 11 8.2 琼脂糖凝胶电泳检测法 11 8.3 人类DNA定量试剂盒 12 9 DNA标本保存 12 10 记录管理 12 11 注意事项及实验室安全 12 参考文献 13 III DNA提取和纯化技术标准操作规程 1 范围 本规程规定了从人类血液、组织、体液、培养细胞中提取和纯化基因组 DNA 的系列方法，同 时详细阐述了 DNA 提取的软硬件设备要求。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本规程的引用而成为本规程的条款。凡是注日期的引用文件，其随 后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本规程，然而，鼓励根据本规程达 成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适 用于本规程。 GB/T 1.1-2000 标准的结构和编写规则 GB 19489-2004 生物安全通用要求 ISO 15189 医学实验室质量和能力的专用要求 ISO 9001:2000 质量管理系统-要求 WS 233-2002 微生物和生物医学实验室生物安全通用准则