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第39卷第2期 东华大学学报(自然科学版) V01．39，N。．2
2013年4月 JOURNAL0FDONGHUAUNIVERSITY(NATURAI，SCIENCE)Apr．2013
文章编号：1671—0444(2013)02—0202—05
番红菌素中碳甲基转移酶(SfcF)的
表达纯化及酶活性的检测
郭建平1，唐满成2，李凯1
(1．东华大学化学化工与生物工程学院，上海201620；
2．中国科学院上海有机化学研究所生命有机化学国家重点研究室，上海200032)
摘要：研究了番红菌素生物合成过程中的一个碳甲基转移酶(S{cF)的酶活反应时间曲线和动力学
参数，并证明了其催化功能．通过镍柱亲和层析纯化得到碳甲基转移酶，用聚丙烯酰胺凝胶电泳
甲基转移酶的生物催化活性并分析得到其酶动力学数据．在碳甲基转移酶的生物催化作用下，可实
min
现酪氨酸羟基邻位碳的甲基化，得到3-甲基酪氨酸．通过时间曲线的测定，发现反应时间在50
以内，酪氨酸浓度低于400“mol／I．时，底物的转化率与时间呈线性变化．通过碳甲基转移酶的活性
检测和动力学常数的测定，为深入研究番红菌素的生物合成机制奠定了基础，并为其结构类似物
ET一743(成药)的合成研究提供有益参考．
关键词：生物催化；番红菌素；甲基转移酶；酪氨酸；3-甲基酪氨酸
中图分类号：Q555．1 文献标志码：A
The and DetectofSfcF，
Expression，PurificationActivity
a inSafracin
C—Methyltransferase
1
Kai
GUO 2，LI
Jian．pin91，TANGMan-cheng
of and 201620，China；
Chemistry，ChemicalEngineeringBiotechnology，DonghuaUniversity，Shanghai
(1．College
2．State of andNaturalProducts InstituteofOrganicChemistry，
KeyLaboratoryBioorganic Chemistry，Shanghai
Chinese of 200032，China)
Sciences，Shanghai
Academy
kinetics ofthe
of reactiontimeand
Abstract：Curves
enzyme parameters
involvedinthe ofsafracinwas aswellasits functionwas
biosy
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