拟南芥fel21突变体的分子鉴定.pdfVIP

第12卷第4期 广州大学学报(自然科学版) V01．12No．4 2013正 of Science 2013 8月 Journal Edition) GuangzhouUniversity(Natural Aug． 文章编号：1671—4229(2013)0443021-05 拟南芥乒您一J突变体的分子鉴定 田长恩8…，陈羽中8，王龙涛8，梁创明8， 周玉萍8…，陈琼华8，程惠贞8b (广州大学a．生命科学学院；b．植物抗逆基因功能研究广州市重点实验室，广东广州510006) 出长下胚轴的表型．文章报道了对该突变体进行分子鉴定的结果．首先利用PCR方法，验证了T—DNA在IQM2 1，CRYl)突变体的表型极为相似，所 中的插入位点．因为该突变体的表型与蓝光受体隐花色素l(cryptocrome 23l 以继而对居f2一』中的c尺¨基因进行了分子鉴定．结果表明，在该基因的起始密码ATG后第1bp处也存在 Cryl基因互作的良好材料． 关键词：居12一』；1QM2；CRYl；分子鉴定 69 文献标志码：A 中图分类号：Q78；Q thaliana)是双 十字花科的拟南芥(Arabidopsis 有较高的相似性帕1．IQMl基因首先是从曾被称为 子叶植物生物学研究的模式植物。1．2000年底，拟．扣rJ—J的突变体中克隆得到的，故被称为Ferl．所 南芥的基因组测序完成，为其基因功能研究奠定 以，最早便将所购买的At3913600基因的突变体称 了基础。2J．众所周知，突变体是研究基因功能的最 为．斥f2一J(凡rJ．1ike2一J，Fel2一J)．初步研究表明， 为重要的材料．经特殊处理，拟南芥较易发生突 店f2一』在白光和蓝光下呈现出长下胚轴的表型J． 本文将报道对这一突变体进行进一步表型和分子 变，如利用物理(如辐射处理)、化学(如EMS处 鉴定的结果． 理)及生物(如T．DNA插入)方法进行人工诱变， 已经建立了多个可公开索取的突变体种子库，使 得拟南芥的基因功能研究进展十分迅速1。3． 1 材料与方法 钙调素(calmodulin，CaM)作为细胞内Ca2+受 体，在钙信号转导中起着十分重要的作用’41．不 1．1 植物材料 过，CaM本身不是结构蛋白，也不具备酶、转录因 子或离子通道活性，必须通过钙调素结合蛋白 态型，由本实验室保藏．T．DNA插入突变株SALK． (calmodulin-bindingprotein，CaMBP)来调节细胞 Ara． Resource StateUni— 生理．因此，研究CaMBP是解析CaM信号通路的bidopsisBiological Center，Ohio versity，USA)． 重要途径∞。．拟南芥IQM2由AG913600编码，是 1．2生长条件 IQM家族的第二个成员，含有1个IQ基序，推测 是一个Ca“不依赖性的CaMBP。”“． 幼苗：将灭菌种子接种在1／2MS培养基上