芬布芬铜Ⅱ牛血清白蛋白相互作用的光谱法研究.pdfVIP

第30卷，第5期 光谱 实验室 V01．30，No．5 01 ChineseJournal 2 of 3 3年9月 SpectroscopyLaboratory 芬布芬一铜(1Ii牛血清白蛋白 相互作用的光谱法研究①② 王晓霞◎ 王正德 刘云颖 (内蒙古科技大学化学与化工学院内蒙古包头市阿尔丁大街7号014010) 摘要模拟生理条件下，应用荧光光谱法研究了芬布芬对牛血清白蛋白，铜(I)对牛血清白蛋白以 及铜(I)对芬布芬和牛血清白蛋白荧光光谱特性的影响。实验表明：铜(I)和芬布芬均可使牛血清白蛋白 的荧光强度发生静态猝灭，并且在铜(Ⅱ)存在下，芬布芬对牛血清白蛋白的荧光猝灭作用显著增强。根据 荧光猝灭双倒数图计算芬布芬和牛血清白蛋白的结合常数为8．44×104，结合位点数为0．97。荧光猝灭双 倒数图计算的结果表明。芬布芬和牛血清白蛋白之间的结合常数和结合位点数均随铜(I)浓度的增大而 增大。很据三者结合反应的研究，进一步探讨了芬布芬、铜(I)在生物体内与蛋白质相互作用的机理。 关键词荧光光谱法；芬布芬；铜(I)；牛血清白蛋白；二元配合物；三元配合物 中图分类号：0657．32 文献标识码：A 文章编号：1004—8138(2013)06—3330—05 1 引言 血清白蛋白是血浆中含量最丰富的载体蛋白，它与许多内源化合物及其药物的相互作用已进 强的抗炎镇痛作用，临床主要用于类风湿性关节炎和其他疼痛的治疗[4]。铜作为酶、激素、维生素、 核酸的组成部分，维持着生命的正常代谢过程，是生命的核心[s]。目前非甾体类药与血清白蛋白作 位点数和结合力类型，研究了CU(I)存在下对FBF和BSA结合常数的影响。 2 实验部分 2．1仪器与试剂 温水浴(巩义市英峪予华仪器厂)。 均为分析纯。实验用水为二次蒸馏水，无荧光杂质。 FBF溶液：以0．05mol／LpH7．0的Tri—HCl溶液配制，以0．10mol／L NaCl维持离子强度，浓 度为1．0×10一mol／I。。BSA溶液：以0．05mol／I。pH 新基金资助项目(No．2012NCL034) ②本刊编者按：根据作者意见“研究”两字予以保留。但本刊认为这两字可删去，因为删去并不影响论文的内容实质。科技论文的 题目宜简朴无华。 ③联系人．电话：(0472)5951561；E-mail：wxx572369@163．com 作者简介：王晓霞(1984一)．女，内蒙古包头市人．讲师，硕士．主要从事光谱分析工作。 收稿日期；2013—05—15；接受日期：2013-06—13 万方数据 第5期 王晓霞等：芬布芬一铜(I)一牛血清白蛋白相互作用的光谱法研究 7．0的Tris—HCl缓冲溶液。 2．2实验方法 在室温条件下，用lcm石英荧光池，荧光激发和发射波长狭缝宽度均为5nm，荧光激发波长为 280nm，记录346nm的荧光强度。 FBF(1：1)的混合物；e：FBF的荧光发射光谱(见图1)。 (2)在11个10mI．比色管中，分别加入lmI。1．0×10一S．mol／LBSA，再依次加入一定量的1．0 见表1； X10～mol／L (3)在11个10mI。比色管中，分别加入lmI。1．0BSA，再依次加入一定量的1．0 (4)在(2)中再分别加lmI。浓度为1．0×10-2mol／L和1．0×10～mol／LCuCl。，用二次蒸馏水 定容至刻度，摇匀，放置10min后取样测定其荧光发射强度。 3结果与讨论 300 3．1 FBF和Cu(Ⅱ)对BSA的猝灭作用 由于蛋白质中色氨酸、酪