梁山慈竹挥发油成分的GCMS分析及抑菌活性评价.pdfVIP

第30卷，第5期 光 谱实验室 V01．30，No．5 0 2 1 ChineseJou,‘nal 3 3年9月 ofSpectroscopylaboratory 梁山慈竹挥发油成分的GC／MS 分析及抑菌活性评价① 姚曦② 岳永德 汤锋 (国际竹藤中心北京市朝阳区望京阜通东大街8号100102) 摘，要采用水蒸气蒸馏法，从梁山慈竹竹秆及竹叶中提取挥发油，通过气相色谱一质谱联用法对梁 山慈竹竹秆及竹叶挥发性成分进行分析．采用面积归一化法测定了挥发油中各组分的相对质量分数，利用 抑菌圈法分别对枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、番茄青枯菌、大肠杆菌进行抑菌性研究。结果显示，从竹 秆和竹叶水蒸气蒸馏所得挥发油中分别检测出40种和76种化合物，其中竹秆中主要成分为14一甲基十五 乙酯(4．87 竹叶精油对水稻白叶枯菌抑制能力明显。 关键词梁山慈竹；挥发油；气相色谱一质谱分析；抑菌活性 中图分类号：0657．63 文献标识码：A 文章编号：1004—8138(2013)05—2344—07 1 引言 植物挥发性组分作为一种主要植物化学成分广泛存在于各类植物中。已有研究发现，植物挥发 油由于其特殊的化学组成，在很多研究中表现出了很好的生物活性，一些植物挥发油具有抗氧化、 抗菌、杀虫等活性口七]，成为新的特效低毒天然香料、抗氧化剂、防腐杀菌剂的重要来源。竹子是禾本 科竹亚科多年生常绿植物，有着复杂的次生代谢。近年来，本课题组针对竹叶挥发性化学成分进行 了相关研究口_5]，并取得一定进展。 竹叶挥发油的成分组成复杂，不同的提取方法获得的挥发性成分也存在较大的差异[6]。研究表 明口]，提取方法的不同，竹叶挥发性成分在种类、个数及相对含量方面差异很大，采用水蒸气蒸馏萃 取技术能够获得较为完整的挥发油组分信息。本研究通过水蒸气蒸馏法，以蒸气的状态释出慈竹杆 与慈竹叶挥发性次生代谢产物，基于气相色谱一质谱联用技术分析挥发性组分的种类及含量，同时 评价两种精油的细菌抑制活性，为慈竹代谢产物分析提供基础数据，并为竹子综合开发利用提供科 学依据。 2 实验部分 2．1材料与仪器 ①国家“十二五”科技支撑计划项目(2012BAD2380302) ②联系人，姚曦，电话(010E—mail：yaoxi@icbr．ac-c“ 作者简介：姚曦(198l一)．男．北京市人．助理研究员．博士生．主要从事植物化学、食品分析工作。 收稿日期：2013—03—20；接受日期：2013—03—28 万方数据 第5期 姚曦等：梁山慈竹挥发油成分的GC／MS分析及抑菌活性评价 干)，于60C烘干至恒重后粉碎，取过60目筛的竹粉于干燥器内备用。 无水乙醚、正己烷、无水硫酸钠均为分析纯试剂，北京化工试剂有限公司。 Aglient 疗仪器厂)。 2．2实验方法 2．2．1精油的提取 参考中华人民共和国药典(2005年版)中的标准方法进行提取。 称取一定量处理好的不同材料，放入1I，的圆底烧瓶中，加入10倍体积蒸馏水，微沸提取6h， 结束蒸馏。收集正己烷层，过无水Na：SO；干燥，精油样品收集于棕色样品瓶中，待测。 2．2．2气相色谱一质谱条件(GC／MS) 5。C／rain，升至Ioo‘c，保持5min，再以5 2．2．3精油抑茵实验 2．2．3．1培养基的制备 三角瓶中，用封口膜封口。于121。C下湿热灭菌30min，冷却后放人4℃冰箱中保存备用。 2．2．3．2抑菌圈的测定 采用抑菌圈法进行评价。 制直径8ram的圆滤纸片若干，干热灭菌后放入竹秆／竹叶精油中浸泡2h。用无菌枪头吸取适 宜浓度的菌悬液0．1mI。于已倒好的NA培养基平板上，用涂布器涂布均匀，用无菌镊子取已浸泡 精油的滤纸片贴在固体平板上，每皿贴3片，同时另取无菌滤纸作对照。每组处理设3个重复。处 理完成后，将培养平板置于28，C恒温培养箱中培养24h后，用抗生素效价测定仪测出抑菌圈直径。 以抑菌圈平均直