丹酚酸B通过Akt—eNOS通路对大鼠心肌缺血／再灌注损伤保护作用的研究.pdfVIP

104 陕西中医 2013年第 34卷第 1期 丹酚酸 B通过 Akt—eNOS通路对大鼠心肌缺血 ／ 再灌注损伤保护作用的研究 周 丹 权 伟 关 月 朱艳荣 郭 超 王艳华 奚苗苗 文爱东△ 第 四军医大学西京医院药剂科 (西安 71OO32) 摘 要 目的 ：观察丹酚酸 B (SalvianolicacidB，SalB)对心肌缺血 ／再灌注 (myocardia1ischemia／ reperfusion，MI／R)损伤大鼠的保护作用，并进一步探讨 Akt—eNOS通路在其 中的关键作 用 。方法 ：通过结扎冠状动脉制备大 鼠MI／R损伤模 型 ，将动物 随机分为假手术组 、模 型组 、 SalB低及高剂量组。除假手术组和模型组动物于再灌注时给予生理盐水外，SalB低 、高剂 量组动物于再灌注时给予 SalB溶液 (20，6Omg／kg)。再灌注结束后，伊文思蓝 (Evans Blue，EB)、2，3，5一氯化三苯基 四氮唑蓝 (Tetrazolium chloride，TTC)双染法测定心肌梗死面 积，酶联免疫吸附试验 (Enzyme—linkedimmunosorbentassay，ELISA )试剂盒检 测血 清中 肌酸激酶 同工酶 (creatinekinase—MB，CK—MB)和乳酸脱 氢酶 (1actatedehydrogenase，LDH) 的水平，免疫印迹 (Westernblot)法检测心肌 组织中Akt、p—Akt和 eNOS、PeNOS蛋 白的 表达。结果 ：与模型组相 比，salB低 、高剂量组大鼠心肌梗死面积 明显减少 (P0．05)，血 清中CK—MB、LDH 活性 明显下降(P0．05)，并且 SalB低、高剂量组 P—Akt／Akt及 P— eNOS／eNOS相对灰度值均 明显高于模型组 (P0．01)。结论 ：Sa1B对大 鼠MI／R损伤有 一 定的保护作用 ，其机制可能与激活 Akt—eNOS信号通路相关 。 主题词 心肌再灌注损伤 ／中医药疗法 丹参 ／治疗应用 酶联免疫吸附测定 免疫印迹法 动物实 验 大 鼠 【中图分类号1 R541 【文献标识码】 A 【文章编号1 1000—7369(2013)01—0104—04 缺血性心脏病是当今世界威胁人类健康 的首敌。随着冠 1 材 料 1．1 实验动物及分组 清洁级雄性健康 SD 状动脉 内溶栓和冠脉搭桥等内外科治疗手段 的广泛应用 ，继之 大 鼠4o只，体质量 250～270g，购 自第 四军医大学动物 中心。 出现 的心肌缺血 ／再灌注 (myocardialischemia／reperfusion， 动物分笼饲养 (环境温度 24℃，湿度 6O ～7O )，术前 12h禁 MI／R)损伤 日益受到心脏病学家的高度重视 。中药治疗 MI／R 食 ，自由饮水 。将大 鼠随机分为 4个组 ，即假手术组 、模 型组 、 损伤疗效确切 、前景 良好 。许多从 中药 中分离得到的化合物都 SalB低及高剂量组 ，每组 1O只。 具有抗 MI／R损伤 的作用 ，其 中对于丹参心肌保护作用的研究 1．2 主要药品与试剂 SalB(贵州迪达科技有限公司)； 最为引人关注 。 肌酸激酶 同工酶 (creatinekinaseMB ，CK—MB)(上海西唐 生物 丹参 (RadixSalviaeMiltiorrhizae)为唇型科植物丹参 的干 科技有限公司)；乳酸脱氢酶 (1actatedehydrogenase，IDH)和 燥根及根茎 。丹参的有效成分复杂 ，主要有丹参酚 、丹参素 、丹 考马斯亮蓝蛋 白定量试剂盒 (南京建成生物工程研究所)；2，3， 参酮等 。现代医学研 究