表达大肠杆菌分子伴侣GroEL、 GroES和GrpE载体的构建及其应用.pdfVIP

表达大肠杆菌分子伴侣GroEL、 GroES和GrpE载体的构建及其应用.pdf

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第21卷第1期 激光生物学报 Vol_2lNo.1 2012年2月 ACTALASERBIOLOGYSINICA Feb.2012 doi:10.3969/j.issn.1007·7146.2012.01.010 载体的构建及其应用 许鹏,王蕾蕾,程备久,范军+ (安徽省作物生物学重点实验室,安徽农业大学生命科学学院,安徽合肥230036) 摘 要:大肠杆菌(Escherichiacoli)共表达系统常要求质粒具有不同抗生素抗性以及不同的复制子。利用粘性 pR-GESP质粒的大肠杆菌细胞没有明显差异,它们对玉米丝氨酸消旋酶的可溶性表达有部分促进作用,但对N 端含有组氨酸标签的玉米铁氧还蛋白还原酶的表达没有作用,在三个含有不同抗生素基因的质粒中共表达分 子伴侣、5一氨基乙酰丙酸合酶和尿卟啉原III甲基化酶,两个酶连续催化的荧光产物在细胞内积累量为562.13± 性表达和催化功能。 关键词:分子伴侣;大肠杆菌;表达载体;粘性末端PCR技术;蛋白可溶性 中图分类号:Q71 文献标识码:A 文章编号:1007—7146(2012)ol-0046-06 ConstructionoftheVector and GroEL、GroES Expressing GrpE Its fromEscherchiacoliandApplication 4 XU Jun Peng,WANGLeilei,CHENGBeifiu,FAN ProvincialLabof ofLife (The Key Science,SchoolScience,AnhuiAgricultural Crop University,Hefei230036,Anhui,China) inEscherichiacolioften thedifferent withdifferentantibioticresist— Abstract:Coexpressionsystem requires plasmids were for ance and PCR reactions genesreplicons.Usingsticky—endcloningtechnology,twoindependent+PCRperformed theartificial from containstheartificial of and amplifying operonpR—GESPplasmid,which polycistronGroEL,GroES 收稿日期:2011m4-26;修回日期:2011.12-26 ton0627@126.eom 邮箱)fanjun@ahau.edu.cn 万方数据 第1期 from

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