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维普资讯 · 34 · 中国优生与遗传杂志2004年第 12卷第4期 AGT基因调控的细胞因子与AGT235 多态性和高血压的关系 刘 萍 。余元勋 。张 立 ，杨善志。。王爱玲 (1．安徽省优生优育遗传医学中心，合肥．230031 2．安徽医科大学附属医院儿科，舍肥。230032 3．安徽省立医院内科) 摘 要： 我们用微量ELISA法分别测定了高血压患者组和其同胞健康对照组的血中白介素一1、白介素一6、肿瘤坏死 因子的浓度。经统计学处理发现高血压组的白介素一1、肿瘤坏死因子的血浓度比对照组有显著升高；某些AGT基因调控的 细胞因子及AGT235的多态性在原发性高血压的发病过程中。可能协同地起着重要的作用。 关键词： 原发性高血压；细胞因子；AGT235多态性；基因调控 中图分类号：R544．1 文献标识码：A 文章编号：1006—9534(2004)04—0034—02 白细胞介素一1(IL一1)、自细胞介素一6(IL一6)及肿瘤 5orJ／孔包被酶标板．4℃过夜。1％BSA／PBS封闭 1h，加入 坏死因子(TNF)是一组主要由单核巨噬细胞、内皮细胞等产 50A／1：40稀释的待测血浆。37℃保温 lh。0．05％Tween一20／ 生的细胞因子．是机体炎症反应和一系列病理生理过程的需 PBS洗 3次。加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的IL一1、IL一 要介质。近年来发现血中AGT主要由肝脏合成，局部AGT 6、TNF的单抗(1：2500稀释)，37℃保温 1h。同样用 0．05％ 在血管壁中合成。AGT基因的转录和表达受某些激素和细 Tween一2O／PBS洗3次。加40mg％邻苯二胺(OPD)底物室 胞因子调腔。IL一1、IL一6、TNF等细胞因子，可通过细胞内 温暗处显色3min。每孔加入2NH2SO45Ol。终止酶反应。在 特异性受体。促进AGT基因的转录和表达。使血管紧张素 Ⅱ 490nm下比色测定。并计算浓度。 的产：生也相应增加并使血压升高…。 按本实验室方法进行AGT235多态性检测。所用PCR引 ：我们用微量ELISA法测定了高血压患者组及同胞健康 物 1为：5一AGAACTGGATGTTGCTGCTG一3。(627～ 对照组中IL一1、IL一6、TNF的血浓度(U／rn1)并检查了两组 646nt)。弓I物 2为：5一TGC-~GTCCACACTGGcTCGC一3 人AGT基因235位密码子的基 因型多态性。以便探讨 以上 (724～705nt)。经92℃40s变性，55℃40s退火。72℃90s延 两种因素与原发性高血压发病的相互关系。 长。循环3O次。最后经72℃延长 10rain进行扩增反应，扩增 产物经BstUI内切酶酶切．再经2％琼脂糖凝胶电泳分离区 资料与方法 带。在紫外透射仪下观察。记录基因型结果。 细胞因子 对照标准品为①基因重组人 IL一1，纯度 结 果 398％．比活性为2×10U／mg，活性为1．5×10U／ml；②基 因重组人 IL一6．纯度96％，比活性为 1×10U／mg．活性 1．EHT组和NT的IL一1、IL一6、TNF血浓度均测定两 为0．8×10U／ml；③基因重组TNF，纯度96％。比活性为 次．取平均值，结果见表 1。 1．5×10U／mg。活性为 1×10U／ml。产品购 自美国Gene— 表 1 EHT组和NT组 IL一1、IL一6、 jyme公司。 TNF血浓度平均值比较 ：!．血清标