家蝇乙酰胆碱酯酶基因的克隆与序列分析.pdfVIP

维普资讯 950 CHINATROPICALMEDICINEVo1．6No．6Ocf幽 r2006 中国热带医学 2006年第6卷第6期 [论 著] 家蝇乙酰胆碱酯酶基因的克隆与序列分析 方晓东，黄俊生 摘要 ：目的 克隆家蝇Ace基因并进行表达，并对家蝇 AChE序列进行分析 ，为利用基因工程进行酶改造提供必要 的 参考。 方法 结合 已有的文献资料 ，利用生物信息学方法对家蝇 AChE的序列进行分析，包括密码子偏爱性、系统发 生、三维结构预测等。 结果 成功克隆家蝇 Ace基 因，并利用 同源模建方法获得 了家蝇 AChE的三维结构，以果蝇 AChE为参考，判断了家蝇AChE应属于AChE2家族。 结论 根据所得家蝇AChE的三维模型从理论上分析了因AChE 中一个氨基酸突变导致家蝇产生有机磷抗性的可能原因，并为半理性改造家蝇 乙酰胆碱酯酶提供 了三维模型。 关奠词 ：乙酰胆碱酯酶；序列分析；进化树 ；三维结构 ；同源模建 中图分类号：R384．2 文献标识码：A 文章编号：1009—9727(2006)06—950—03 CloningandsequenceanalysisofAChE genefrom Housefly (Muscadomestica)．FANGXiao—dong，HUANGJun— sheng．(StateKeyBiotchnologyLaboratoryforTropicalCropsChineseAcademyofTropicalA culturalSciences，Haikou571101， Hainan，P．R．China) Abstract：Objective Tocloneacetylcholinesteraes(AChE)genefrom Houesfly(Muscadomestica)inordertoprovideneces— saryreferenceofrgeneticengineeringstudy． M ethods TheesquenceofAchE was，bymeansofbioinformatics，analyzed in— cludingcodonbias，systemicgenesis，predictingofthree— dimentionalstructurebyusingbioinformatics．Results AChE generfom houesflywasclonedandAChE three—dimentionalstructurewasobtainedbyhomologousmodeling．AChE，belongedtoAChE2fami— ly，from fruityWas atkenasreference， Conclusion Baesdonhouesfly’SAChE three—dimentionalstructureitishteoreticallyin— dicatingthepossibilitythatamuattionofanaminoacidinHousefly’SAChE canleadtotheresisatnceofhouesflytoorganicphospho— ruspesticide， KeywOrds：Acetylcholinesteraes ；Sequence analysis；Three — dimentionalstructure ；Homologousmodeling 乙酰胆碱酯酶 (Aeetylcholinesteraes，AChE，EC31．1．7)是生 所以在正 向引物 的BamHI位点的3’末端加上一个 G以保证 物神经传导中的一种关键酶，主要存在于神经元和神经