重组牛γ2干扰素单克隆抗体的研制.pdfVIP

中国动物传染病学报 　2009 ,17 (4) :15 - 19 　 Chinese J our nal of Animal Infectiou s Di sea se s ·研究论文 · γ 重组牛 干扰素单克隆抗体的研制 张成全 ,陈 　祥 ,牛中伟 ,杨卫冲 ,徐正中 ,孟 　闯 ,潘志明 ,黄金林 ,焦新安 (扬州大学 江苏省人兽共患病学重点实验室 ,扬州 225009) γ ( γ) ( ) γ 摘 　要 : 为制备针对重组牛 干扰素 rBo IFN 的单克隆抗体 mAb , 以纯化的原核表达融合蛋白r Hi sBo IFN γ γ 为免疫原 ,用纯化的 r GSTBo IFN 为筛选抗原 ,应用淋巴细胞杂交瘤技术 ,研制抗 rBo IFN 的 mAb 。结果获得 γ 13 株稳定分泌抗Bo IFN mAb 的细胞株 ,命名为 1C12 、1F7 、1 G5 、3 E6 、4D5 、5 E11 、5 G4 、6 F8 、6 G6 、7 E9 、8D3 、8 F8 和 9 G11 。腹水的效价除单抗 9 G11 外 ,其余效价都在 1 ∶80 000 以上 ; 除 5 G4 mAb 亚类为 Ig G2b 外 ,其余均为 Ig G1 。 γ γ DotEL ISA 结果表明 ,所得单抗只与融合蛋白 r Hi sBo IFN 和 r GSTBo IFN 反应 ,而不与其它重组细胞因子和 对照细菌反应 ,显示其良好的特异性 。West ern blot 显示所获单抗能与相应的融合蛋白发生反应 , 出现特异性条 γ γ 带 。同时所获单抗均能与牛 IFN 标准品反应 。13 株单抗均为针对 rBo IFN 的特异性 mAb , 为进一步研究 γ rBo IFN mAb 在牛的免疫调控 、牛疫病的致病机制及其诊断中的应用奠定基础 。 γ 关键词 : 重组牛 干扰素 ; 原核表达 ; 单克隆抗体 中图分类号 : R392 11 文献标识码 : A 文章编号 : (2009) 0400 1505 D EVELOPMENT OF MONOCLONAL ANTIBOD IES A GAINST RECOMBINANT BOVINE INTERFERONGAMMA Z HAN G Chengquan ,C H EN Xiang ,N IU Zhongwei , YAN G Weichong , XU Zhengzhong ,M EN G Chuang ,PAN Zhimin g , HU AN G J inlin ,J IA O Xinan ( ) Key L ab of Z oonos is of J i angs u P rov i nce , Yang z hou Uni ve rs i ty , Yang z